植物内生真菌的分离、鉴定、活性筛选及曲霉属内生真菌CY008次生代谢产物的研究

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本文分别以日本榧树、芦苇和泽漆等植物为研究对象,针对其根、茎、叶等不同组织的内生真菌进行了分离和纯化,并对日本榧树内生真菌的分布进行了初步研究。从三种植物中,共获得了102株内生真菌,其中鉴定到属的有60株。同时通过微生物拮抗实验,筛选了其中60株内生真菌的抗菌活性,实验结果表明,23株真菌(其中分离自日本榧树的有9株,芦苇7株,泽漆7株)的发酵液的乙酸乙酯提取物具有抑制病原菌的活性。在抗菌活性研究中,发现分离自狗牙根(Cynodondactylon)一株曲霉属真菌CY008(菌种由本课题组宋勇春副教授提供)具有较强的广谱抗菌活性。 在此基础上,通过大规模固体发酵,对CY008次生代谢产物进行了初步研究,共分离得到化合物16个。其中已鉴定结构的化合物有7个:包括1个香豆素类化合物——kotanin(化合物3),4个萘并吡喃酮类的单体或二聚体化合物——rubrofusarinB(化合物4)、fonsecinoneA(化合物5)、asperpyroneB(化合物6)和aurasperoneA(化合物7),以及麦角甾醇(化合物1)和烟酸(化合物2)。抗菌活性实验结果显示,化合物4对大肠杆菌(Escherichiacoli)的MIC值为3.9μg/ml(硫酸卡那霉素的MIC值为3.9μg/ml)、7对白色念珠菌(Candidaalbicans)和红发毛癣菌(Trichophytonrubrum)的MIC值分别为3.9和1.9μg/ml(酮康唑的MIC值均为3.9μg/m);此外,酶抑制实验结果表明,4和7对黄嘌呤氧化酶的IC50值分别为16.8μM和10.9μM(别嘌呤醇的IC50值为9.8μM);化合物4对SW-1116细胞的IC50为4.5μg/ml(5-FU的IC50值为5μg/ml)。
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