【摘 要】
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该研究的主旨在从小麦全蚀病自然衰退土壤中筛选鉴定产生抗生素4-diacetylphloroglucinol(Phl)的荧光假单胞菌,明确该抗生素生产菌在中国小麦全蚀病自然衰退中的地位,并进一
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该研究的主旨在从小麦全蚀病自然衰退土壤中筛选鉴定产生抗生素4-diacetylphloroglucinol(Phl)的荧光假单胞菌,明确该抗生素生产菌在中国小麦全蚀病自然衰退中的地位,并进一步研究Phl及其产生菌的拮抗性能和防病效果,开发其在植物病害生物防治中的潜力,为了更好的对该抗生素进行操作和应用,用构建基因组文库的方法克隆该抗生素的合成基因,并将该基因转化Phl阴性菌,实现抗生素的异源表达.应用Phl产生菌和从衰退土壤中分离到的其它抑制性Phl阴性菌进行9次循环的小麦单作生防试验,其生防效果可以持续到9次循环结束,但并没有观察到明显的衰退现象,也证明了自然衰退复杂的作用机制.应用粘性质料pZLCm2构建插入片段为45kb左右的CPF10基因组文库,以Phl2a和Phl2b为引物用PCR法筛选文库,得到了3个含有Phl合成基因的阳性克隆,将阳性克隆转化失去产Phl能力的突变菌株CPF10-2,产生抗抗生素的能力能够得以恢复.通过亚克隆将Phl基因缩小到12kb的片段,连接穿梭载体pDSK519,得到重组质粒pDSK519-12,将该质粒转化Phl阴性菌P32,可以使P32获得产生Phl的能力,提高防病效果.
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