论文部分内容阅读
【目的】建立新生大鼠铅损伤的动物模型。从整体水平、细胞水平、分子水平研究铅对新生大鼠体格生长、神经发育的影响。采用健脑益智(JNYZ)液进行干预,评价其效果。 【方法】苏大实验动物中心提供的新生Wistar大鼠5窝,每窝中大鼠被随机分在正常组、低铅组、高铅组。在出生时采用腹腔注射醋酸铅溶液建立新生大鼠铅损伤模型,各组剂量分别为0,20mg/kg,60mg/kg。各鼠均由母鼠喂养。同时,干预组均腹腔注射JNYZ液0.1ml,至17天时为实验结束。实验观察指标:(1)新生大鼠体格生长和脑发育的影响,体格生长如体重、脑重、萌牙时间、开眼时间,早期神经反射如断崖回避反射、表面翻正反射、斜板转头反射,感觉、运动功能发育如听觉惊愕、视觉定位、归巢试验、和向前运动、游泳的多项指标;(2)新生大鼠脑组织生物化学指标的影响,如蛋白质含量(Folin-酚试剂法)、精脒和游离氨基酸(丹酰氯标记薄板层析法)、SOD(黄嘌呤氧化酶法)、NO(硝酸还原酶法);(3)新生大鼠神经细胞Bcl-2、Bax基因、NGFR蛋白表达(酶联免疫组化法);(4)JNYZ液抗铅损伤的实验研究。 【结果】(1)不同剂量铅损伤在低Pb、高Pb组中,Hb分别为86.6±3.9、68.2±5.76g,与正常组相比有显著差异(t分别为3.76、7.62:P均<0.01),并且与铅累积吸收剂量呈显著负相关(r=-0.949;P<0.01);(2)体重增长值、脑重在低铅、高铅组中与正常组相比有显著下降;开眼时间、断崖回避反射、斜板转头反射、表面翻正反射、听觉惊愕和向前运动的达标日龄,以及视觉定位、归巢试验、游泳等多项指标均显著落后于正常组;o)脑组织中蛋白质、精胖和氨基酸神经递质中IAA、SOD、NO的含量在低铅、高铅组中均显著低于正常组;而氨基酸神经递质中EAA的量在低铅组中显著高于正常组,但在高铅组中显著低于正常组,并且脑中蛋白质、精眯、IAA、SOD、NO的含量分别与铅累积吸收剂量呈显著负相关 *分别为一o.724、-O.793、-o.824、-0.8 16、-o.672;P均<o.01);(4)神经细胞比上、NGFR蛋白表达在低铅、高铅组中均显著低于正常组,而Bax的表达则显著高于正常组;(5)应用JNYZ液后,低铅、高铅干预组分别与损伤组相比,体格生长如体重、脑重均有明显增高,早期神经反射如断崖回避反射、斜板转头反射、表面翻正反射和早期感觉、运动神经功能的发育如听觉惊愕、向前运动、游泳等指标均有明显提高。脑组织中的生化指标,如蛋白质、精眯、IAA、NO、SOD均有显著增加,EAA在高铅干预组明显高于高铅组,而在低铅干预组却显著低于低铅组。神经细胞中Bcl上、Bax和NGFR蛋白表达在低铅、高铅干预组和损伤组间亦有显著差异。 【结论】腹腔注射醋酸铅建立动物损伤模型具有简便可靠、易于控制。研究表明铅严重干扰新生大鼠体格生长和脑发育。采用JNYZ液对铅诱导的发育脑的损伤在整体、细胞、分子水平上均有重要的保护作用。