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本研究根据已发表的IBRV gI基因序列，设计并合成一对特异性PCR引物：P1 5，GAGGAAGAGGAGGAGTTTGACG—3 P25-AGCCGCAAATAACACGGTGTGC-3。优化了PCR反应条件，并进行了初步应用。结果表明，优化PCR反应条件为：最佳变性温度为94℃，最佳退火温度为56℃，最佳循环次数为35个循环。PCR系统组成优化结果为：最佳引物浓度为25pmol，最佳dNTP用量为2ul，最佳DNA Taq聚合酶用量为1 unit，最佳Mgcl2浓度为3.0mM。应用该PCR扩增体系可扩增出IBRV的450bp特异性核苷酸片段，与理论设计扩增片段大小相符。而应用该PCR扩增体系进行牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒、牛冠状病毒的扩增，未见阳性结果。说明该PCR扩增体系具有很好的特异性。该PCR扩增体系可检测出10-6稀释的模板，说明该PCR扩增体系具有较高的敏感性。将该PCR扩增体系进行临床初步应用，结果显示阳性率为30％，与病毒分离所得结果基本相符。以上结果说明，本研究建立的IBRV PCR诊断方法具有潜在的应用前景。