目的:阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是最常见的神经退行性疾病,主要表现为进行性认知障碍和记忆能力下降,严重危害中老年人的身心健康和生活质量。阿尔茨海默病(AD)也是一种基于不可逆性痴呆的进行性脑退行性疾病,其临床特征是认知功能逐渐受损。人口数量激增以及老龄化日趋严重,导致AD和MCI人口急剧增加,这使家庭和社会负担沉重,并引起了政府和医疗界的广泛关注。尽管可以通过认知筛查和神经心理学评估来诊断认知障碍,但患者应采取软预防措施或者早期干预治疗。因此,早期诊断和干预对于AD的诊断和治疗至关重要。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体介导的炎症反应和MG活化在AD的发病机制中发挥重要作用。越来越多的证据表明,老年小胶质细胞表现出增加的促炎表型,被激活的小胶质细胞在AD的神经炎症中发挥核心作用。表没食子儿茶素没食子酸酯((-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG)是绿茶的一种主要多酚成分,具有显著的抗炎、抗病毒、抗氧化、抗癌、抗微生物感染和神经保护等作用。近来研究发现,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶11(caspase-11)的活化也能诱发NLRP3-ASC/caspase1通路的激活,这种特殊的激活途径称为“非经典NLRP3炎症小体活化通路”,caspase-11能够通过这种途径促进IL-1β和IL-18的成熟释放,进而介导炎症反应。因此,本研究从经典以及非经典的NLRP3炎性小体激活的角度,探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)发挥神经保护功能中的作用及其机制。方法:应用LPS+Aβ诱导的BV2细胞和大鼠原代小胶质细胞建立MG活化模型,建立空白组,LPS+Aβ组,LPS+Aβ+EGCG组。1)Western blot和ELISA检测EGCG对BV2和大鼠原代小胶质细胞内Iba-1表达及相关炎性因子IL-1β、IL-18的转录、表达和分泌水平。2)应用LPS+Aβ诱导的BV2细胞或大鼠原代小胶质细胞与SH-SY5Y进行条件培养,流式细胞术和CCK8检测SH-SY5Y细胞的存活率。3)Western blot、免疫荧光染色法等检测EGCG对BV2细胞内caspase-1与Iba-1的共定位、caspase-1活性、caspase-1 p20、caspase-11 p26以及NLRP3蛋白的表达水平。4)caspase-1特异性抑制剂Z-YVAD-FMK处理LPS+Aβ诱导的BV2细胞,Western blot等检测caspase-1活性,IL-1β、IL-18、Iba-1的表达水平。5)应用IKK抑制剂wedelolactone处理LPS+Aβ诱导的BV2细胞,Western blot检测TLR4,p-IKK/IKK和p-NF-κB/NF-κB,caspase-11 p26及caspase-1 p20、IL-1β、IL-18、Iba-1的蛋白表达水平。6)实验数据用平均数±标准差表示,采用16.0 SPSS软件分析,两组间比较采用t检验,所有测定均重复三次,以P≤0.05表示差异有统计学意义。结果:1)EGCG可在降低LPS+Aβ诱导的BV2细胞和大鼠原代小胶质中Iba-1表达的基础上,抑制炎性因子IL-1β、IL-18的转录、表达和分泌水平,提示EGCG可抑制MG内炎症反应。2)EGCG显著增加与LPS+Aβ诱导的BV2或大鼠原代小胶质细胞条件培养的SH-SY5Y细胞的存活率,提示EGCG可通过抑制MG内炎症反应改善神经元存活。3)EGCG可显著降低LPS+Aβ诱导BV2以及大鼠原代小胶质细胞中的caspase-1与Iba-1共定位,caspase-1活性及caspase-1 p20、caspase-11 p26蛋白的表达水平,提示EGCG抑制MG活化与其抑制caspase-11表达和NLRP3炎症小体介导的炎症反应有关。4)EGCG可显著降低LPS+Aβ诱导BV2以及大鼠原代小胶质细胞中的TLR4,p-IKK/IKK和p-NF-κB/NF-κB的表达水平。提示EGCG抑制caspase-11表达和NLRP3炎症小体介导的炎症反应与其抑制TLR4/NF-κB通路有关。5)与EGCG处理一致,Z-YVAD-FMK处理可降低caspase-1活性,caspase-1、IL-1β、IL-18、Iba-1的表达水平。Wedelolactone可降低LPS+Aβ诱导的BV2细胞TLR4,p-IKK/IKK和p-NF-κB/NF-κB,caspase-11 p26及caspase-1 p20、IL-1β、IL-18、Iba-1的蛋白表达水平。结论:没食子儿茶素-3-没食子酸酯(EGCG)能够通过抑制LPS+Aβ诱导的MG活化和炎症反应的发生,进而发挥神经保护作用。这种作用可能与TLR4/NF-κB通路介导的caspase-11炎症小体和NLRP3炎症小体有关。因此,深入研究EGCG神经保护作用的相关机制,将有助于为治疗阿尔兹海默症提供新的方向,并为将来的临床应用打下坚实的理论基础。