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目的:苦参碱治疗乳腺癌的机制尚不明确,本文旨在研究苦参碱抑制乳腺癌的作用机制(探讨苦参碱通过对PI3K-Akt信号通路及miR-21的作用抑制乳腺癌的机制)。 方法:在苦参碱处理乳腺癌细胞后,应用MTT法测定乳腺癌MCF-7细胞的活力;以流式细胞术、TUNEL和透射电镜检测细胞的凋亡;应用real-time RT-PCR检测miR-21的变化;应用蛋白印记技术检测PTEN的变化;以蛋白印迹技术检测蛋白PTEN,pAkt,Akt,bcl-2,bax和cleaved casepase-3的变化。 结果:苦参碱可以抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长,以5-FU作为阳性对照药,苦参碱的IC50为0.8mM。与对照组Ctrl相比,苦参碱0.8mM给药组处理后TUNEL检测乳腺癌细胞凋亡增多,透射电镜发现明显核分裂、凋亡小体,以及流式细胞术检测凋亡百分率增加了约2.6倍(p<0.05)。同时与对照组相比,苦参碱0.8 mM可以明显抑制miR-21(降低了2倍,p<0.001)的表达水平,PTEN显著上调约1.75倍(p<0.05),Akt的磷酸化水平减少了1.72倍(p<0.05),使下游凋亡蛋白Bax/Bcl-2上调2.2倍(p<0.05)、凋亡效应分子cleaved casepae-3上调1.5倍(p<0.05)。 结论:苦参碱可以通过调节miR-21/PTEN/PI3K-Akt信号通路诱导细胞凋亡而抑制乳腺癌MCF-7细胞生长。