【摘 要】
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DREB类转录因子和RD22类蛋白在植物应答和抵抗多种非生物逆境中起重要作用。本论文首次从强抗逆植物蒙古沙冬青中克隆到AmDREB2基因,并对该基因和实验室在前期从蒙古沙冬青克
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DREB类转录因子和RD22类蛋白在植物应答和抵抗多种非生物逆境中起重要作用。本论文首次从强抗逆植物蒙古沙冬青中克隆到AmDREB2基因,并对该基因和实验室在前期从蒙古沙冬青克隆的另一个基因AmRD22进行了表达分析,然后将它们分别转入拟南芥,通过转基因拟南芥对其抗逆功能进行了鉴定,主要研究结果如下：(1)用PCR方法扩增到AmDREB2的编码区cDNA,推测其编码蛋白由175个氨基酸残基组成,分子量为19.96KDa,等电点为7.26,属于DREB2型转录因子,可能为亲水性蛋白,定位在细胞核。(2)AmDREB2的表达受高盐、干旱和低温胁迫的显著诱导,尤其在干旱和盐胁迫下其表达量持续上调。(3)成功将AmDREB2编码区cDNA片段连接到植物表达载体pCAMBIA3301的rd29A启动子之后,通过农杆菌介导法转化拟南芥,经鉴定和繁殖获得T3代纯合株系。(4)通过对T3代纯合株系在干旱、低温、高盐和外源ABA等处理下进行表型鉴定,证明AmDREB2在耐旱和耐盐性中起正调节作用,而对外源ABA的敏感性起负调节作用。(5)AmRD22的表达主要受干旱和高盐胁迫的诱导,而受低温诱导的幅度较小。(6)利用农杆菌介导法将AmRD22基因转化拟南芥,经鉴定和繁殖获得T3代纯合株系。将其在干旱、低温、高盐和外源ABA等胁迫处理下进行表型鉴定,证明该基因主要在耐盐性中起重要作用。
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