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目的:二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)可以诱导多种肿瘤细胞周期阻滞而起到抑制增殖的作用,但具体作用机制尚不清楚。本实验旨在研究DADS诱导人鼻咽癌细胞CNE-2细胞周期阻滞的相关基因表达,探讨其分子机制。方法:MTT实验、细胞计数法观察不同浓度和作用时间DADS对CNE2细胞的生长抑制作用,HE染色观察IC50值浓度的DADS对体外培养的人鼻咽癌CNE-2细胞形态的影响,流式细胞术分析不同浓度和作用时间DADS对CNE-2细胞的周期分布;通过SuperArray人细胞周期基因芯片检测DADS作用于CNE-2细胞后周期相关基因的表达谱。RT-PCR和western-blot验证与筛选关键性基因。结果:MTT比色法检测显示,DADS能明显抑制CNE2细胞增殖,呈浓度依赖性,50μmol/L,100μmol/L,200μmol/L和400μmol/L DADS处理48h后,对CNE2细胞增殖的抑制率分别为2.78%、6.09%、22.64%和57.05%,与对照组相比,差异有显著性意义(P<0.05)。细胞计数结果表明,常规培养的CNE2细胞群体倍增时间为24.48h,当DADS的浓度由50μmol/L增加到400μmol/L时,其细胞群体倍增时间由26.57h延长到92.36h,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。细胞形态学观察显示:50μmol/L,100μmol/L,200μmol/L和400μmol/L DADS处理细胞48后,与对照组细胞相比,异型性明显减少,核浆比例明显减小,并且部分细胞呈凋亡形态学改变。流式细胞仪分析结果提示:DADS呈浓度依赖性将CNE2细胞阻滞在G0/G1期。基因芯片结果显示:200umol.L-1 DADS作用CNE2细胞4h后与对照组比表达上调2倍以上的基因有:RECK、VEGF、PLK3、SUGT1、FLCN、TACC1、FRK、HECA、JMY、KRAS、PARD6B、PDGFB、CDKN2B、CYLD、HK2、IL1B、CCNG2、SASH1、FOSB、DUSP1;表达下调2倍以上的基因有:GTSE1、PLK1、TFDP1、RCC1、ANAPC7、RAN、SMC4L1、BUB1B、CTCF、BRCA2、KLK10。该31个差异基因与DADS诱导人鼻咽癌CNE2细胞G0/G1周期阻滞密切相关,其中与G0/G1周期相关的基因包括:RECK、CDKN2B、RCC1等。RT-PCR和Western blot验证结果表明,DADS作用后CDKN2B表达增强,RCC1表达减弱,与芯片结果一致。结论:1、DADS具有抑制人鼻咽癌CNE-2细胞生长,并与细胞G0/ G1期阻滞有关。2、DADS诱导人鼻咽癌CNE-2细胞G0/ G1周期阻滞,可能是多个基因结果。这些基因中也有G1期基因(CyclinE1和CyclinE2)的改变,说明DADS对整个细胞周期都有一定的影响。3、DADS对CNE-2细胞G0/ G1周期阻滞的分子机制可能与CDKN2B基因表达增强,RCC1基因表达降低有关;