一、原代鼠肝细胞培养方法的研究.该文用非灌注法,采用0.1﹪胰蛋白酶和0.2﹪胶原酶Ⅳ消化液分别在三个不同条件下进行了原代鼠肝组织块培养和鼠肝细胞单层培养:1.不同年龄组小鼠肝细胞体外培养;2.不同血清浓度及成分培养基培养;3.冰浴或常温下处理肝组织块.二、原代鼠肝细胞巨细胞病毒感染模型的研究.为建立鼠肝细胞巨细胞病毒感染模型,采用非灌注法及改良低血清培养基获得原代小鼠肝细胞,然后感染重组鼠巨细胞病毒.通过光镜观察细胞病变、电镜寻找病毒颗粒及5-溴-4-氯-3-吲哚半乳糖苷染色检测感染细胞内重组病毒复制及原位杂交法检测病毒基因,证实病毒感染肝细胞成功.同时通过对同期相同培养条件、未感染细胞光镜和电镜观察具有肝细胞形态和超微结构及细胞培养上清白蛋白分泌的检测证实感染细胞为肝细胞.结果表明,我们成功建立了鼠肝细胞巨细胞病毒感染模型.