热休克蛋白70免疫BALB/c小鼠的细胞毒实验

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目的:通过体内免疫法和3H-TdR释放法,观测从艾氏腹水瘤细胞中提取的热休克蛋白70-抗原肽复合物(heatshockprotein70-antigenpeptidecomplex,HAC70)诱导的抗肿瘤免疫,并探讨其抗瘤机制,为临床肿瘤疫苗的研制提供新方法。 方法:取传代一周,热休克后的艾氏腹水瘤细胞,经超声破膜、100,000g超速离心后,取上清除盐并浓缩,上样于肝素-琼脂糖亲和层析,选择洗脱组分制成蛋白疫苗。以该疫苗免疫荷瘤BALB/c小鼠,检测HAC70诱导的抗瘤作用;用3H-TdR释放法检测效应细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。 结果:经HAC70免疫的荷瘤小鼠与对照组相比平均皮下肿瘤结节重量减轻、体积缩小、腹水出现时间推迟、荷瘤生存期延长,经统计学分析差异均有显著性意义;在3H-TdR释放法测脾细胞杀伤活性的实验中,当效靶比为100:1及200:1时,免疫组效应细胞杀伤活性显著高于对照组及荷瘤组,差异亦有显著性意义。 结论:经肝素-琼脂糖亲和层析纯化的HAC70可通过诱导机体产生特异性杀伤活性,抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,延长荷瘤生存期限。
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