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目的：以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白细胞外免疫球蛋白样结构域(MOGIgd)为抗原免疫C57BL/6小鼠，建立人类疾病多发性硬化(MS)的动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)；检测EAE小鼠Foxp3mRNA的表达水平及CD4+CD25+Treg细胞的数量，初步探讨CD4+CD25+调节性T细胞在MS发病机制中的作用。
方法：①采用分子克隆技术诱导表达MOGIgd-TrxA融合蛋白，金属螯合亲和层析纯化，与完全弗氏佐剂形成抗原乳化物，按300μgMOGIgd/只小鼠于侧腹壁皮下多点注射；同时以硫氧还蛋白(TrXA)和完全弗氏佐剂的乳化物免疫小鼠作为对照组；以豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)和完全弗氏佐剂的乳化物按0.4ml/只同样方法免疫小鼠作为阳性对照组；生理盐水和完全弗氏佐剂的乳化物免疫小鼠作为正常对照组。免疫后第0及48h腹腔内注射400ng百日咳毒素(PT)。双盲法连续早晚观察30天，通过评估动物的临床神经功能、组织病理(HE染色和Kluver-Barrera法髓鞘染色)情况，评价模型的质量。②经流式细胞仪(FACS)检测小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞；real-timePCR检测Foxp3mRNA的相对表达水平。③利用相关性分析探讨EAE模型CD4+CD25+调节性T细胞及Foxp3mRNA表达水平与临床神经功能及病理改变的相关性。
结果：①MOG组及GPSCH组小鼠均呈慢性非缓解型病程，表现为不活泼、弓背、尾部张力下降、肢体瘫痪、震颤、大小便失禁，两组在发病时间、达峰时间、临床神经功能评分等方面差异无统计学意义(P＞0.05)。TrxA组及正常对照组无一动物发病。模型组(包括MOG组和GPSCH组)动物HE染色可见血管周围炎性细胞浸润，胶质结节形成，髓鞘染色可见斑片状髓鞘脱失，大脑、小脑、脑干和脊髓均有不同程度受累。②MOG组CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例为(4.71±1.61)％，GPSCH组为(1.44±0.65)％，均明显低于TrxA组和正常对照组(P＜0.01)，且MOG组和GPSCH组之间的差异亦具有统计学意义(P＜0.01)。MOG组标准化Foxp3mRNA的表达量为(2.26±1.97)，GPSCH组为(1.44±1.20)，均低于TrxA组的(8.58±3.34)(P＜0.01)；但MOG组和GPSCH组间的差异无统计学意义(P＞0.05)。③相关性分析显示，模型组小鼠CD4+CD25+调节性T细胞与炎症浸润、神经功能评分呈负性相关(P＜0.05)，而与髓鞘脱失相关性不具有统计学意义(P＞0.05)，其与Foxp3mRNA表达水平间亦存在相关性(r=0.849，P＜0.05)。
结论：用MOGIgd免疫C57BL/6小鼠诱导EAE模型稳定，发病率高，为今后进一步研究MS的免疫发病机制和采取有效治疗措施打下基础。