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本文主要对长春七药材的质量标准、微丸的制备工艺和长春七抗肿瘤活性三方面内容进行了研究。
在实验研究部分,首先建立了长春七药材的质量标准,包括鉴别、检查和含量测定三个方面,在含量测定中以蛇床子素为检测指标,建立了用高效液相色谱法测定长春七中蛇床子素含量的方法;其次,对长春七的最佳提取纯化工艺进行验证,提取纯化出本实验所需的长春七总香豆素,经测定所提取浸膏中长春七总香豆素含量为52.7%,符合有效部位制剂的要求;再次,在微丸成型工艺研究中,筛选了辅料种类、用量、辅料与药物的配比,确定最佳处方为药物与辅料比例3.5:4:1:1.5,润湿剂为80%乙醇,以泛制法制备微丸,以堆密度、表面形态和圆整度、休止角、脆碎度为指标,对微丸制备工艺进行评价,经测定微丸中总香豆素含量为9.47%;最后,采用MTT法检测不同浓度蛇床子素对人肝癌HepG2细胞、人结肠癌HT-29细胞和人脐静脉血管内皮ECV-304细胞体外增殖的抑制情况,计算抑制率及半数抑制浓度(IC50),倒置显微镜下观察细胞形态的变化。经过计算蛇床子素作用24h人肝癌HepG2细胞、人结肠癌HT-29细胞和人脐静脉血管内皮ECV-304细胞的IC50分别为0.0566μmol/ml、0.0499μmol/ml和0.3236μmol/ml,蛇床子素作用24h、48h、72h人肝癌HepG2细胞的IC50为0.0566~0.0116μmol/ml。倒置显微镜下观察阴性对照孔中细胞贴壁生长良好,形态正常,数量明显增加,给药孔中细胞贴壁生长的较少,大多数呈圆形悬浮在溶液中,细胞形态差,培养液中细胞碎片多。
实验结果说明,蛇床子素对人肝癌HepG-2细胞、人结肠癌HT-29细胞和人脐静脉血管内皮ECV-304细胞的体外增殖均有显著抑制作用,提示蛇床子素具有较好的抗肿瘤作用,值得对长春七的抗肿瘤作用进行进一步研究,为拓展长春七的应用范围和开发新的抗癌中草药提供实验依据。