鼻咽癌中DAPK基因启动子甲基化及其蛋白表达与自噬的相关性研究

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[目的]:  研究鼻咽癌中DAPK基因启动子甲基化及其蛋白表达的意义和相关性。研究鼻咽癌中DAPK蛋白及自噬标志蛋白Beclin1、LC3表达的意义和相关性。  [方法]:  1.应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)技术检测15例鼻咽黏膜慢性炎、40例鼻咽癌原发灶和11例鼻咽癌颈淋巴结转移灶中DAPK基因启动子的甲基化状态。  2.应用免疫组化SP法检测15例鼻咽黏膜慢性炎、59例鼻咽癌原发灶和11例鼻咽癌颈淋巴结转移灶中DAPK、Beclin1和LC3蛋白的表达。  [结果]:  1.鼻咽癌原发灶中DAPK基因启动子甲基化阳性率为87.50%(35/40),明显高于鼻咽粘膜慢性炎26.67%(4/15)(P<0.01),与鼻咽癌颈淋巴结转移灶90.91%(10/11)相比差异无统计学意义(P>0.05)。DAPK基因启动子甲基化状态与临床病理参数如性别、年龄、TNM分期、T分期、N分期无关(P>0.05)。鼻咽癌原发灶中DAPK蛋白阳性率为25.42%(15/59),明显低于鼻咽粘膜慢性炎组织66.67%(10/15)(P<0.05),与鼻咽癌颈淋巴结转移灶27.27%(3/11)相比差异无统计学意义(P>0.05)。鼻咽癌原发灶中DAPK蛋白表达与临床病理参数如性别、年龄、TNM分期、T分期、N分期无关(P>0.05)。鼻咽癌原发灶中DAPK基因启动子甲基化和DAPK蛋白表达呈负相关关系(P<0.01,rs=-0.545)。  2.鼻咽癌原发灶中Beclin1蛋白阳性率为35.59%(21/59),明显低于鼻咽粘膜慢性炎86.67%(13/15)(P<0.01),与鼻咽癌颈淋巴结转移灶54.55%(6/11)相比差异无统计学意义(P>0.05)。Beclin1蛋白表达与临床病理参数如性别、年龄、TNM分期、T分期、N分期无关(P>0.05)。  3.鼻咽癌原发灶中LC3蛋白阳性率为45.76%(27/59),明显低于鼻咽粘膜慢性炎93.33%(14/15)(P<0.01),与鼻咽癌颈淋巴结转移灶27.27%(3/11)相比差异无统计学意义(P>0.05)。LC3蛋白表达与临床病理参数如性别、年龄、TNM分期、T分期、N分期无关(P>0.05)。  4.鼻咽癌原发灶中DAPK蛋白表达与自噬标志蛋白Beclin1或LC3表达无相关性(P>0.05); Beclin1蛋白表达与LC3蛋白表达呈正相关关系(P<0.05,rs=0.312)。  [结论]:  1.鼻咽癌中DAPK基因启动子高甲基化及其蛋白表达下调,可能与鼻咽癌的发生有关,与鼻咽癌的进展包括TNM分期、淋巴结转移均无关,与自噬标志蛋白Beclin1、LC3表达均无关。  2.鼻咽癌中自噬标志蛋白Beclin1、LC3表达均下调,二者协同抑制自噬可能与鼻咽癌的发生有关。自噬标志蛋白Beclin1、LC3表达与鼻咽癌的进展包括TNM分期、淋巴结转移均无关。
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