携带OXA-23型磷矿青霉烯酶基因鲍曼不动杆菌的分子分型研究

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目的:了解鲍曼不动杆菌医院分布、碳青霉烯酶基因携带情况及分子流行病学特点。   方法:使用Whonet5.4软件从实验室检测数据库筛选2007年1月-2009年12月临床分离自患者血液、引流液等不同部位(痰液标本除外)鲍曼不动杆菌不重复分离株,分析菌株医院分布及耐药情况(纸片扩散法确定),对部分多药耐药株(Multi-drug Resistance,MDR)进行PCR检测苯唑西林酶(OXA群)基因和Ⅰ类整合子基因;选取部分b1aOXA-23-like扩增阳性基因进行测序分析;脉冲场凝胶电泳(Pulse—field Electrophoresis,PFGE)进行基因分型。收集2007年1月-2010年10月血流感染鲍曼不动杆菌菌株,进行碳青霉烯酶(苯唑西林酶和金属酶)基因、新德里金属D内酰胺酶-1(NDM-1)基因检测并进行PFGE分型,选取代表性菌株进行多位点序列分型(Multilocus Sequence Typing,MLST),同时重点分析血流感染患者临床资料;初步了解血流感染危险因素在我院患者分布情况。   结果:我院2007年1月-2009年12月临床分离自痰液以外多个不同部位标本鲍曼不动杆菌共计510株,其中多药耐药株为427株,所有菌株除对头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素耐药率较低外,对其他11种抗菌药物耐药率介于68.8 ̄84.9%之间,对选取的194株多药耐药菌进行基因检测显示:194株均携带有b1aOXA-51-like基因,187株菌携带Ⅰ类整合子;164株携带b1aOXA-23-like基因,1株菌检出b1aOXA-51-like基因;未检出b1aOXA-24-like基因;对b1aOXA-23-like基因测序,进行比对后确定为b1aOXA-23基因,PFGE基因分型显示,A型和B型为主要检出型别,分别为79株和58株,3年A型均有检出,而B型和H型在2008年增加明显,且2009年B型占到第1位。2007年1月-2010年10月间共收集有完整临床信息血流感染鲍曼不动杆菌不重复分离株共70株,其中多药耐药菌64株。70株菌均携带有b1aOXA-51-like基因,62株携带b1aOXA-23基因,未检出b1aIMP、b1aVIM、b1aOXA-58-like、b1aOXA-24-like及NDM-1基因,PFGE基因分型显示,70株菌共分6型,A型和B型为主要检出型别;选取的10株菌MLST结果表明,7株为ST2型,且此7株菌均为MDRAB;3株为新发现型别,命名为ST104、ST105和ST106;患者临床资料分析发现88.6%血流感染患者感染前曾接受一个或多个部位插管,92.9%患者感染前曾应用一种或多种抗菌药物。   结论:我院鲍曼不动杆菌检出有逐年上升趋势且耐药情况严重,多药耐药株常携带有OXA-23型碳青霉烯酶基因,科室内部和不同科室间存在同型别流行,主要型别经PFGE确定为A型和B型;经MLST确定为ST2型(属国际克隆Ⅱ型)。血流感染与其他部位感染主要流行型别一致,但多药耐药株占比更高;血流感染患者基础疾病重且感染前多经历插管等侵入性操作以及大量抗菌药物使用。
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