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自 1935 年 Ternnat 和 Wiggers 描述了冠状动脉结扎后局部心肌运动发生改变以来,人们对急性心肌缺血和心肌梗死后的病理生理变化有了进一步认识。至 70 年代,医学界开始使用术语心室重构,用以指代这种复杂的变化。传统的观念认为,心梗后的心力衰竭是心室功能的异常。近年来深入的病理生理学和治疗学研究使人们认识到,心力衰竭并非只是由于某种生化缺陷所致的泵功能低下,根本原因是心室结构的改变。从 20世纪 90 年代以后,已逐渐明确心肌重构是心衰发生、发展的分子细胞学基础。因此,心室重构才是心力衰竭的特征,能全面地影响心室的功能状态及生存预后,是心力衰竭患者患病率和死亡率的决定因素。故此,近年来抑制心室重构、改善心室功能的研究逐渐成为国内外心血管疾病研究的重点和热点之一。 心肌重塑的特征是:心肌细胞肥大、心肌细胞凋亡和心肌细胞外基质的变化。其中,心肌细胞凋亡或坏死以及与调节收缩功能有关的病理性心肌细胞肥大,在心室重构的发生、发展过程中的地位尤为重要。心肌细胞凋亡在心肌重塑中的作用愈来愈受到重视,很可能是使心衰从“代偿”向“失代偿”转折的关键因素。目前,新的治疗目标(targeted therapy)是改变心室结构的变化,即抗重构(anti-remodeling)效应。对急心肌梗死后心肌细胞肥大和凋亡的深入研究,并探讨两者在重构中的作用,将是一项很有意义的研究工作。 实验研究和临床实验均已表明,经过药物干预,心室重构的过程是可以缓解的。中医药对心血管疾病的诊疗有其独到的理论与方法,中药作用时的多角度、多靶点、易耐受、副作用少等优点为越来越多的医学界人士所看好。 急性心肌梗死属于中医胸痹心痛(包括真心痛)的范畴。胸痹心痛的主要病机为心脉痹阻,其病位在心,病理变化表现为本虚标实。参麦注射液源自古方生脉散,由人参和麦冬两味药组成。具有益气复脉、养阴生津的功效,临床上广泛用于治疗心脑血管疾病。 参麦注射液具有扩张冠状动脉,增加冠脉血流量,改善心肌缺血,降低血粘度,促进损伤的 DNA 合成,减轻缺血组织损伤,恢复细胞活性,以及增强心肌功能等作用。这不仅为众多临床与基础研究所证实,也为本实验探讨其改善心室重构作用奠定了坚实的基础。 本研究运用多种现代实验手段,分别从整体-细胞-蛋白质-基因等不同水平观察了参脉注射液对心肌梗死后心功能和心室重构的影响,并探讨参麦注射液对参与心室重 4 参麦注射液改善急性心肌梗死大鼠心功能、左室重构作用及其机制的研究构病理过程的心肌细胞肥大和凋亡两大重要因素的干预作用。 实验分为两部分:整体实验研究:参麦注射液改善急性心肌梗死大鼠心功能、左室重构的作用离体实验研究:探讨参麦注射液对心肌细胞肥大和凋亡的干预作用。第一部分:参麦注射液改善急性心肌梗死大鼠心功能、左室重构作用1 方法 健康雄性 10-12 周龄 SD 大鼠 76 只, 结扎大鼠左冠状动脉前降支(LAD)建立大鼠心肌梗死后心肌重构模型,随机分为,①MI 1 week 组:心肌梗死(MI)后 1 周模型组,②SM 1 week 组:心肌梗死(MI)术后参麦注射液治疗 1 周组,③MI 2 weeks 组:心肌梗死(MI)术后 2 周模型组,④SM 2 weeks 组:心肌梗死(MI)术后参麦注射液治疗 2 周组;另设 SH 1 week 组:假手术 1 周组、SH 2 weeks 组:假手术 2 周组。各组给药时间皆自造模当日开始,参麦注射液给药量是依据人正常用量的 5 倍量确定的。每日腹腔注射 1 次,连续给药至取材时为止。模型组和 Sham 组大鼠腹腔注射等量的生理盐水。采用多导生理记录仪测量、分析心功能参数:平均动脉压(MAP),左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和下降速率(-dp/dtmax),以反映左室收缩与舒张功能。留取血液和心肌标本分别作相应的处理,测定心脏心脏总重量(HW)、左室截面直径,并计算心室重量指数(VWI:HW /体重);放免法测定血浆及心肌组织中 AngⅡ和 ANP 含量;HE 染色、Masson 染色,观察组织结构的变化,透射电镜观察超微结构改变。2 结果 (1)左冠状动脉结扎致心肌梗死后,LVSP、+dp/dtmax 和-dp/dtmax 降低,LVEDP 升高,参麦注射液可明显改善上述指标的变化,表明参麦注射液可改善急性心肌梗死后受损的左心室收缩和舒张功能。(2)参麦注射液治疗后,梗死区心肌细胞变性程度减轻,肌原纤维排列较模型组规则,闰盘较整齐,线粒体虽仍有肿胀、轻度峭断裂甚至空泡化,但较相应时间点模型组明显减轻。心肌细胞核染色质结构接近正常;肌浆网轻度扩张,肌丝排列规则、整齐,无明显坏死;间质水肿不明显;胶原增生减少,可见少量炎细胞。(3)与假手术组相比,左冠状动脉结扎致心肌梗死后两周心脏湿重、心室重量指数和左室截面直径显著性增加,参麦注射液可明显改善上述指标的变化。模型组一周时虽有增加,但无统计学意义;MI 后梗死区和非梗死区胶原含量随时间增加。(4)参麦注射液可明显降低急性心肌梗死后血浆和心肌组织中的 AngⅡ和 ANP 含量,尤以降低循环中的 ANP 最显著。中文摘要 5第二部分:探讨参麦注射液对心肌细胞肥大和凋亡的干预作用1 参麦注射液对心肌细胞肥大的抑制作用1.1 方法 乳鼠心?