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目的：TRAIL具有诱导乳腺癌细胞发生凋亡的作用，但在部分细胞株中产生抗性。促分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶-激酶3(3，MEKK3)是MAPK家族的上游调节成分，具有细胞保护和抑制凋亡的作用。本研究设计应用siRNA抑制乳腺癌MCF-7细胞MEKK3的表达,并结合应用TRAIL，以期能促进TRAIL诱导乳腺癌MCF-7细胞发生凋亡。
方法：应用化学合成的MEKK3-siRNA，以脂质体介导MEKK3-siRNA转染人乳腺癌细胞MCF-7，以RT-PCR和Western blotting法检测MCF-7细胞的MEKK3 mRNA和蛋白的表达。应用MTT法和流式细胞术检测MEKK3-siRNA与TRAIL联合处理后MCF-7细胞的增殖和凋亡。通过凝胶电泳迁移率变动分析技术检测TRAIL与MEKK3-siRNA联合作用后对MCF-7细胞NF-kappa B信号通路激活程度的影响。
结果：MEKK3-siRNA转染后能有效而暂时性抑制MCF-7细胞中MEKK3 mRNA水平和蛋白水平的表达(P<0.01)，TRAIL具有抑制MCF-7细胞增殖作用，但其抑制作用较弱。MEKK3-siRNA可以增强TRAIL对MCF-7细胞的生长抑制作用和诱导凋亡作用，两者联合应用存在显著的协同效应；MEKK3-siRNA单独应用可以抑制MCF-7细胞NF-kappa B信号通路的激活，MEKK3-siRNA与TRAIL联合作用也可明显抑制MCF-7细胞NF-kappa B信号通路的激活。
结论：siRNA干扰MEKK3基因表达，能促进TRAIL对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的诱导作用，其机制可能是通过抑制MEKK3 mRNA及蛋白表达，进而抑制NF-kappa B信号通路的激活而起作用。