目的：制作与鉴定兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合生物支架,并对其进行生物学安全性评估,为设计和制作性能良好、安全的骨组织工程复合支架提供实验依据。方法：(一)1.采用密度梯度离心联合贴壁筛选法,培养兔骨髓间充质干细胞,通过倒置相差显微镜观察、CD29免疫细胞化学检测进行鉴定；2.制作海螵蛸支架,经压酒精法、扫描电镜观察检测其结构特性；3.构建骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合支架,通过MTT法、扫描电镜检测进行鉴定。(二)参考医疗器械生物学评价标准,通过热原试验、溶血试验、肌肉植入试验、细胞毒性试验评估复合支架的生物学安全性。结果：(一)1.密度梯度离心联合贴壁筛选法能有效分离培养原代兔骨髓间充质干细胞；2.海螵蛸支架为多层房架式多孔结构,孔隙率81.73%±6.77%,平均孔隙径180μm×500μm;3.成功制备兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合支架,MTT检测见复合支架上细胞数量随培养时间延长而增多,扫描电镜下见细胞粘附于海螵蛸支架上爬行生长,分泌胞间基质。(二)复合支架各项生物学安全性检测指标均合格。热原试验见各动物体温升高值<0.6。C。复合支架浸提液溶血率为3.88%。复合支架细胞毒性为1级。肌肉植入试验血常规、血生化检查结果示复合支架组与海螵蛸组无明显差异,且随术后时间延长,各项指标渐达标准参考值；病理切片结果示材料周围组织炎症反应随时间延长逐步减轻,肌肉形态逐渐恢复正常。结论：(一).兔骨髓间充质干细胞能与中药海螵蛸联合培养构建复合支架。(二).兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合支架不含明显热原物质,组织相容性、血液相容性良好,无明显细胞毒性,符合生物材料应用要求,可考虑作为骨组织工程生物替代材料促进骨缺损修复。