【摘 要】
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Expansin是一种细胞壁蛋白,它通过打断细胞壁多糖之间的氢键使细胞壁在膨压下伸展。Expansin除了在植物的生长组织中起作用,在植物的非生长组织中可能起松散细胞壁的作用,比如胚
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Expansin是一种细胞壁蛋白,它通过打断细胞壁多糖之间的氢键使细胞壁在膨压下伸展。Expansin除了在植物的生长组织中起作用,在植物的非生长组织中可能起松散细胞壁的作用,比如胚乳弱化过程。莴苣种子胚乳弱化涉及到胚乳细胞壁的降解,推测Expansin可能与莴苣种子胚乳弱化有关。 本文选取莴苣(Lactuca sativa L.cv.Guasihong)种子为实验材料。莴苣种子的胚乳像套子一样包裹着胚,取材时便于分离出珠孔端胚乳和胚根(包含胚轴),是研究胚乳弱化的好材料。莴苣种子在水中吸涨一段时间,胚根突破珠孔端胚乳,完成典型萌发;种子在0.3%的二氯异氰尿酸钠(SDIC)溶液中吸涨时,可以得到胚正常生长而珠孔端胚乳始终不破裂非典型萌发的种子。利用这种非典型萌发的种子与典型萌发的种子作对比,研究Expansin与胚乳弱化中的关系。ABA抑制莴苣种子萌发的研究已有很多报道,本文也利用ABA抑制莴苣种子的萌发,通过研究ABA对Expansin表达的影响,反应出Expansin与莴苣种子胚乳弱化的关系。 本文从莴苣种子中克隆出三个Expansin基因:LsEXP1、LsEXP2和LsEXP3。这三个基因在莴苣种子的珠孔端胚乳和胚根中都有转录表达。莴苣种子在水中吸涨时,LsEXP1和LsEXP2在胚根中表达量比珠孔端胚乳中高,而LsEXP3在珠孔端胚乳中的表达量比胚根中的高,这三个基因表达量的升高都发生在种子萌发之前,开始有种子萌发时(萌发率约为1%)表达量达到最高。这三个Expansin基因的表达可能都与胚乳弱化和胚根伸长有关。 0.3%SDIC处理的莴苣中Expansin的表达与对照不同,LsEXP1和LsEXP3在胚根和珠孔端胚乳中的表达都受到一定的抑制,但是LsEXP1在34 h的珠孔端胚乳中的表达急剧升高;LsEXP2在胚根和珠孔端胚乳中的表达没有受到抑制。0.3%SDIC处理的种子出现非典型萌发,虽然珠孔端胚乳不破裂但也被拉伸,三个Expansin基因都有可能在SDIC吸涨的种子的珠孔端胚乳中表达。 在ABA溶液中吸涨的种子,与水中吸涨相比萌发被抑制。基因表达检测三个Expansin基因在珠孔端胚乳中的表达都受到了抑制;但是ABA对三个基因在胚根中的表达都没有抑制作用或作用很小。ABA可能主要通过抑制珠孔端胚乳弱化相关基因的表达,影响了胚乳弱化,从而抑制了种子的萌发。
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