【摘 要】
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NYD-SP8基因是南京医科大学生殖实验室利用cDNA芯片技术发现的一条新基因.对该基因的测序工作已经完成,已有的研究提示NYD-SP8表达蛋白的功能可能与细胞凋亡相关,也可能参与
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NYD-SP8基因是南京医科大学生殖实验室利用cDNA芯片技术发现的一条新基因.对该基因的测序工作已经完成,已有的研究提示NYD-SP8表达蛋白的功能可能与细胞凋亡相关,也可能参与机体防御性的抗癌机制而具有抗癌作用.该论文在细胞水平研究凋亡通路中NYD-SP8的表达以及NYD-SP8表达蛋白的肿瘤相关功能,以期寻找可能的新型抗肿瘤药物.一、NYD-SP8基因在诱导SMMC-7721凋亡过程中的表达.选用人肝癌细胞株SMMC-7721,利用H<,2>O<,2>和维甲酸类药物4-HPR诱导细胞凋亡,建立体外凋亡模型.采用RT-PCR方法对正常的SMMC-7721细胞和凋亡SMMC-7721细胞进行比较,检测有无目的基因的表达.二、构建NYD-SP8瞬时表达体系获得NYD-SP8真核表达蛋白,观察NYD-SP8蛋白对于293T,SMMC-7721细胞增殖的影响.三、构建稳定表达NYD-SP8蛋白的SMMC-7721细胞系.将NYD-SP8基因转染入SMMC-7721细胞,通过G418的筛选,对得到的单克隆细胞利用RT-PCR方法检测,发现有NYD-SP8基因的表达,对细胞系中NYD-SP8表达蛋白的检测正在研究中.结论:1.通过我们的研究发现,NYD-SP8基因在活性氧诱导的凋亡中没有表达,有两种可能的解释:NYD-SP8基因与活性氧诱导的凋亡通路不相关无关;NYD-SP8基因可能和凋亡无关.2.NYD-SP8表达蛋白可能通过阻滞细胞周期中的G2/M期而具有抑制肿瘤细胞293T增殖的作用,而且这种作用和细胞类型有关.
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