肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae，MP）是引起社区获得性肺炎（Community-acquired pneumonia，CAP）的常见病原体，肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP)可占CAP的10％～40％。人类对MP普遍易感，既往研究以儿童为主，而根据我国最近的CAP致病原调查结果显示，MP已成为成人CAP的首要致病原，故而对成人MPP的研究具有十分重要的意义。由于MP感染的临床症状及影像学表现均缺乏特异性，所以探讨早期有效的实验室诊断方法显得十分重要。MPP的治疗首选大环内酯类抗生素，然而随着该类抗生素的广泛应用，MP对大环内酯类耐药情况越来越严重，特别是在我国，诸多地区的耐药率均已达90％以上。MP对大环内酯类抗生素的耐药机制主要是药物作用靶位23SrRNA基因点突变，其中最为常见的是A2063G位点突变。本研究采用培养法、巢式PCR及血清学方法对成人MPP进行检测分析，建立成人MP早期感染的快速诊断方法。同时了解浙江地区MP耐药现状及耐药机制，为临床合理用药提供理论依据。　　目的：　　1.通过对浙江地区成人CAP患者的咽拭子标本及血清标本进行检测分析，探讨不同检测方法对成人MPP诊断的临床价值。　　2.了解本地区成人MP对大环内酯类抗生素的耐药情况及主要的耐药机制，并分析MP23S rRNA基因突变位点与耐药表型之间的关系，为临床合理用药提供理论依据。　　方法：　　1.标本来源:收集2012年1月～2014年8月于浙江省三所医院就诊的成人CAP患者的咽拭子及血清标本，共650份。　　2.成人MP感染检测方法的研究:选取90例成人CAP患者的咽拭子及血清标本，采用ELISA法、被动凝集法检测血清MP抗体;对临床咽拭子标本及标准菌株进行分离培养;提取咽拭子标本中的DNA，联合正交试验和单因素试验优化巢式PCR条件，在优化的基础上用巢式PCR分别扩增P1、16S rRNA基因，比较检测结果。　　3.MP耐药机制的研究:对650份成人咽拭子标本进行分离培养，应用巢式PCR对临床分离株进行分子鉴定，采用体外药物敏感性试验测定MP临床分离株的最小抑菌浓度(MIC)，筛选耐药菌株;应用巢式PCR扩增MP23S rRNAⅤ区基因，产物进行测序，观察其突变情况。　　结果：　　1.90份受检患者的标本中，PPA法检测阳性65例(72.2％)，ELISA法检测MP-IgA阳性24例(26.7％)，MP-IgM阳性20例(22.2％)，MP-IgG阳性34例(37.8％)。PPA法的滴度越高，ELISA法检测MP-IgA、MP-IgM阳性检出率越高。以16SrRNA基因为靶基因进行巢式PCR可以检出MP的最低DNA浓度为1×10-5ng/μl，以P1基因为靶基因进行巢式PCR可以检出MP的最低DNA浓度为1×10-4ng/μl，故而巢式PCR扩增16SrRNA基因的灵敏度要高于P1基因。另外，巢式PCR扩增16 SrRNA基因检测MP阳性39例(43.3％)，P1基因阳性32例(35.5％)，两者差异具有统计学意义(P＜0.05)。MP临床菌株分离培养阳性8例(8.9％)。　　2.650份咽拭子标本中MP分离培养阳性71例;根据药敏试验结果显示，71株MP临床分离株对红霉素（MIC:128-＞256μg/ml）、克拉霉素(MIC:128-＞256μg/ml)、阿奇霉素(MIC:32-＞64μg/ml)均耐药，未发现四环素类、喹诺酮类耐药株。所有的临床耐药MP株均存在A2063G点突变，并未发现其他位点突变。　　结论：　　1.巢式PCR与血清学方法诊断成人MP感染各具特点，联合检测有助于提高MP检出率和MP感染诊断的准确性。　　2.浙江地区成人MP耐大环内酯类抗生素的情况十分严重，其主要的耐药机制为23 SrRNAⅤ区A2063G点突变。