论文部分内容阅读
背景: 在我国脑血管疾病危害重大，已上升为我国人口死亡和致残的第一因素，而缺血性脑血管病的发病率占其中的70％左右。脑缺血导致的中枢神经系统损伤会导致患者运动和感觉功能受损进而使患者生活质量下降。在我国针刺治疗脑卒中的历史源远流长，其临床疗效好，副作用小，在临床得以广泛使用，但是针刺治疗脑卒中的作用机制并不十分清楚。中枢神经的再生主要受限于神经轴突的再生功能，近年来的研究表明Rho/ROCK信号在神经轴突再生、延长及纤维投射等生物过程中扮演着重要的角色，抑制Rho及其下游激酶ROCK的活性对于中枢神经系统损伤后功能的恢复有一定作用。ROCK又以ROCK1和ROCK2两种同源异构体存在，它们对神经轴突再生的影响区别并不清楚。本实验通过建立大鼠局灶性脑梗死模型观察脑皮质梗死灶周围ROCK1与ROCK2的表达，探讨电针是否通过调节ROCK1与ROCK2在局灶性脑梗死大鼠皮质的表达来影响脑缺血后功能的恢复，为临床进一步研究电针促进缺血性卒中后功能恢复提供理论依据。 目的: 1.观察大鼠局灶性脑梗死后梗死灶周围皮质ROCK1与ROCK的表达及其电针对其表达的影响。 2.探讨电针对大脑缺血组织保护的作用机制。 方法: 清洁级成年健康SD雄性大鼠40只，随机分为正常组，假手术组，模型组和电针组，每组十只。利用改进后的Longa方法对模型组和电针组制作大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型。造模后对大鼠进行longa评分，并作2，3，5—氯化三苯基四氮唑(TTC)染色确定造模成功。在大鼠麻醉苏醒后90min对电针组大鼠进行电针刺激，每天一次，连续针刺14天。分别在术后1d，3d，7d，14d四个时间点对每组大鼠进行神经功能评分(modified neurologicalseverity score mNSS评分)。术后14天时，利用免疫组织化学法观测缺血区周围大脑皮质中ROCK1和ROCK2的分布和表达，运用免疫印迹法检测缺血区侧大脑皮质中ROCK1和ROCK2的蛋白表达。 结果: 正常组和假手术组未出现神经功能缺失表现，术后7d和14d模型组与电针组mNSS评分差异有统计学意义(P＜0.05);免疫组化结果显示，电针组ROCK1/ROCK2表达较模型组明显减少(P＜0.05);免疫印迹法检测结果显示，电针组ROCK1/ROCK2蛋白的表达量较模型组ROCK1/ROCK2蛋白明显减少(P＜0.05)。 结论: 局灶性脑梗死后大鼠脑损区周围皮质ROCK1/ROCK2表达明显上调，电针能有效降低其表达，这可能是电针促进MCAO大鼠轴突再生的机制之一。