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肠出血性大肠杆菌O157:H7感染性腹泻是近年来发现的危害严重的肠道传染病。它除引起腹泻、出血性肠炎外，还可发生溶血性尿毒综合征(HUS)、血栓性血小板减少性紫癜(TTP)等严重的并发症，后者病情凶险，病死率高。目前对病原微生物的检测主要依靠病原体分离培养法、免疫学方法和各种PCR方法。然而，以上方法耗时耗力、敏感性和特异性低、检测费用高，不适用于现场快速检测和基层普及应用。LAMP技术克服了常规技术的缺点，能够在1h内恒温、特异、高效、快速地扩增出109靶序列拷贝的DNA，更适合临床病原微生物的检测要求。但在实际样品检测中常常需要进行前增菌步骤，增菌时间一般在18～24h，因此改善样品处理方法，缩短样品处理时间具有重要的现实意义。本研究将免疫捕获技术与环介导等温扩增（LAMP）技术有效结合，以E. coliO157∶H7菌体作为抗原，首先制备了抗E. coli O157∶H7单克隆抗体及多抗，鉴定纯化后进行特异性试验，其中单抗具备良好的特异性，而多抗经过交叉反应菌体吸收后也达到了同样效果。将二者作为捕获抗体，包被于酶标板，用来特异性捕获样品中的E. coli O157∶H7。其次利用LAMP方法，通过Primer Explorer V4设计LAMP引物，检测大肠O157菌体表面抗原rfbE基因，并探讨其特异性和灵敏度。最后利用已经建立的免疫捕获-实时荧光LAMP方法，对人工污染E.coli O157∶H7的全脂乳进行灵敏度检测。本研究筛选出一株稳定分泌抗E. coli O157∶H7抗体的杂交瘤细胞株，命名为2BA12；成功制备出抗E. coli O157∶H7的单抗和多抗，两种抗体经辛酸-硫酸铵法纯化后进行质量鉴定，单抗的蛋白质浓度为15.125mg/mL，多抗的蛋白质浓度为12.463mg/mL。间接ELISA测得单体效价为1：80000，多抗效价为1：1:64000。经过单抗和多抗捕获后进行的实时荧光LAMP反应，对E. coli O157:H7的检出限分别为2.5CFU/mL和1.8CFU/mL，与LAMP方法检出限水平一致。采用免疫捕获方法进行的样品前处理时间一般在2.5h左右，因此在保证了LAMP方法检出限水平的前提下，本方法明显缩短了前处理时间且具有双特异性优点。最后采用单抗作为捕获抗体对人工污染全脂乳进行灵敏度检测，检出限为8.0CFU/mL。