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研究背景:现代基因工程的飞速发展带动了一些新型药物的广泛研究,如多肽,蛋白质,氨基酸。这些药物在研究与应用中表现出了出了巨大的治疗潜能。但是,它们的不稳定性和很难穿越生物屏障到达靶目标的特点使这种潜能仅局限于实验室阶段。这些新药类物质并不能通过传统的方式有效的传递。如脂质体,作为一种药物传递载体,在血液传递的过程中被快速的清除,且其负载能力低,化学性质不稳定,这些缺陷使其应用受到限制。因此,寻找到一种安全高效的转染试剂是加快药物研究发展的有效方案。研究目的:通过固相合成法合成一种阳离子型多肽,探讨该多肽分子的结构及其自组装的机理,并通过体外细胞实验探索该多肽作为一种新型转染试剂的可行性。研究方法:固相合成法合成序列为RLWRLLWRLWRRLWRLLR的多肽链,半制备液相色谱进行提纯,然后通过质谱进行多肽链的验证。通过芘荧光探针检测该转染试剂疏水区域的形成,电导率测定临界胶束浓度,CD谱图探测其溶液对多肽折叠的影响,动态光散射用于测定其多肽粒径的大小及分散水平。与外源基因进行结合后,通过电泳测定其包裹能力。然后通过一系列细胞实验验证其转染效率,包括转染卵巢癌细胞观察细胞增长,CCK8法检测细胞毒性,细胞迁移实验检测转染后的细胞迁移水平,流式细胞术检测干扰RNA调控细胞周期的水平,最后通过RT-PCR和Western blot从分子和蛋白水平检测转染效率。研究结果:合成并纯化出纯度为90%以上的多肽,质谱确定其分子量为目的多肽。芘荧光探针检测多肽在水溶液中形成了胶束,电导率测得其临界胶束浓度约为0.9mg/ml。RLW18在水溶液中形成的二级结构含82.3%β-折叠,PBS溶液中离子会干扰RLW18形成二级结构。在水溶液中多肽分布不均匀,200nm左右及以下粒径大小含量为44.95%,大部分粒子发生了聚集。RLW18对与干扰RNA的包裹力约为28∶1-22∶1,转染时可选此比例为最优转染配比。RLW18介导外源基因进入卵巢癌细胞进行转染后,细胞增值速度下降,部分细胞控制在G1期和S期,细胞迁移率下降。CCK8毒性实验结果显示其毒性较小,为一种安全的转染试剂。细胞周期,mRNA表达量和FLIP蛋白表达量数据说明,该转染试剂携带外源基因进行转染的效率约为26.7%。研究结论:RLW18作为一种新型的转染试剂,安全性高,毒副作用小,但其本身的聚集现象导致了自组装的纳米粒子较大,不利于胞吞作用,进而降低了转染效率。