【摘 要】
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费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)RT19是分自天津盐碱地的快生大豆根瘤菌,能在含0.6mol/L NaCl的TY培养基上生长.该文采用高分辨率的双向电泳技术,得到不同生长时期的蛋
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费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)RT19是分自天津盐碱地的快生大豆根瘤菌,能在含0.6mol/L NaCl的TY培养基上生长.该文采用高分辨率的双向电泳技术,得到不同生长时期的蛋白表达谱,应用高效的ImageMaster 2D软件进行图谱分析,结果显示:(1)从延滞期到稳定期的末期,所表达的蛋白数量由398个逐渐增加至516个,显示了细胞内的蛋白在不同生长期的动态表达水平.(2)不同生长期的RT19的蛋白表达数量和种类约有80﹪是相同的,证实RT19在正常的生理过程中大部分蛋白的表达是稳定的,即为持家蛋白(如A73).采用高通量的质谱技术和生物信息学,分析了持家蛋白A73的一级结构和功能,初步鉴定为DNA修复蛋白RecN,对于RT19正常的遗传重组和重组修复都是必不可少的.采用差异显示蛋白质组学方法,对对数生长期的RT19(培养20小时)在无盐和盐激5min、50min条件下的蛋白表达谱进行研究.为了探讨RT19抵御盐激和长期盐胁迫所需的整体调节因子的异同,应用差异显示蛋白质组学方法,分别对对数生长期的RT19(培养28小时)在盐激和长期盐胁迫下的蛋白表达谱进行分析、研究.根据差异蛋白质组学的分析和鉴定,发现RT19在盐激和盐胁迫条件下,参与脂多糖的核心成分L-丙三醇-D-甘露庚糖生物合成的两个关键的酶:腺酐二磷酸-L-丙三醇-D-甘露庚糖-6-变位酶和甘露糖转移酶,分别被不程度地诱导.采用SDS-PAGE电泳,对RT19在不同盐激和盐胁迫条件下的脂多糖进行分离,发现RT19的脂多糖的组成发生了显著的变化,并且,盐激导致的脂多糖组成的变化比盐胁迫明显.差异蛋白质组学的分析结合代谢物的研究是探讨RT19耐盐机制的新尝试.
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