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目的:检测结直肠癌标本中NCOA5的表达,分析NCOA5表达与结直肠癌患者临床病理特征之间的关系;在结直肠癌细胞系SW480和SW620中沉默及过表达NCOA5,研究NCOA5对结直肠癌细胞增殖、侵袭迁移、细胞周期的影响及其相关机制。方法:收集临床结直肠癌组织标本,免疫组化及Western blot检测NCOA5的表达。筛选结肠癌细胞株,得到NCOA5高表达细胞株SW620及NCOA5低表达细胞株SW480;构建三条特异性的干扰NCOA5表达序列及一条随机序列的慢病毒表达载体感染SW620细胞株;Western blot、CCK-8法、流式细胞、细胞划痕及Transwell实验分别检测干扰后NCOA5的表达、细胞生长增殖、细胞周期分布、细胞迁移的影响;Western blot检测PI3K/AKT/MMP9信号通路和PI3K/AKT/Cyclin D1、P27信号通路相关蛋白的表达。同时设计构建过表达NCOA5慢病毒载体感染SW480细胞株,Western blot检测PI3K/AKT/MMP9信号通路和PI3K/AKT/Cyclin D1、P27信号通路相关蛋白的表达。Western blot检测PI3K抑制剂LY294002作用于过表达NCOA5的SW480细胞株后下游相关信号蛋白的表达。结果:分析结直肠癌标本的免疫组化及临床资料结果显示,NCOA5在癌组织中高表达(78.6%),NCOA5阳性表达率升高与肿瘤大小(P<0.001)、区域淋巴结转移(P=0.005)、肿瘤TMN分期(P=0.018)有关;Western Blot显示结直肠癌组织中NCOA5表达较癌旁组织显著增高,表达率约为75%。体外成功构建慢病毒干扰载体;感染结直肠癌细胞株SW620后,Western Blot结果显示NCOA5表达下调,CCK-8法结果表明沉默NCOA5后细胞增殖能力下降(P<0.05),流式细胞仪结果显示干扰细胞G0/G1期比例增加,细胞划痕及Transwell实验表明沉默NCOA5后细胞迁移能力下降,P-AKT、MMP9和Cyclin D1表达下降,AKT表达基本不变,P27表达升高。慢病毒过表达载体感染结直肠癌细胞株SW480后,P-AKT、MMP9和Cyclin D1表达升高,AKT表达基本不变,P27表达下降。LY294002作用于过表达NCOA5的SW480细胞株后P-AKT、MMP9和Cyclin D1表达下降,AKT表达基本不变,P27表达升高,与干扰结果一致。结论:1.发现NCOA5在结直肠癌组织中存在高表达,其表达与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期相关,具有作为肿瘤标志物的潜在价值;2.下调NCOA5表达后,结直肠癌细胞株SW620增殖能力显著下降的,细胞周期被阻滞在G0/G1期;3.下调NCOA5表达后,结直肠癌细胞株SW620的侵袭、转移能力显著下降;4.发现PI3K/AKT/Cyclin D1、P27信号通路在NCOA5诱导的结直肠癌中细胞周期阻滞发挥着重要的作用;5.发现PI3K/AKT/MMP9信号通路在NCOA5诱导的结直肠癌侵袭转移中发挥着重要的作用。