缺钙纳米羟基磷灰石/胶原复合支架材料的制备

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骨组织修复材料长期以来都是生物医学材料领域的热门课题。近二十年来,由于组织工程支架材料的很多优点使得其已逐渐成为骨修复材料研究发展的方向。支架材料的发展经历了由单一的生物高分子材料、无机生物陶瓷材料等向复合多孔支架材料发展的道路。羟基磷灰石(HA)与有机聚合物复合的材料是当前硬组织修复材料研究中的热点之一。HA是人骨无机结构的主要成分,具有较好的生物相容性和生物活性,能与骨组织中的其他成分形成牢固的键合,因此HA一直是骨修复和替代材料研究的主要课题。但由于其脆性大,韧性差,在生理条件下缺乏抗疲劳性,因此限制了它的临床应用范围。如果将HA与一些弹性和韧性较好,且成分与人骨接近的生物大分子复合,就可以将二者的优势充分结合起来,有望得到强度高、柔韧好、可塑性强、力学性能好且具有良好生物相容性和生物活性的新一代骨修复材料。基于以上原因,本课题所采用的生物大分子为胶原,将胶原蛋白与HA进行复合,从而最大限度地发挥其各自的特点,扩大其临床应用范围。本文以草鱼鱼鳞为原料,采用胃蛋白酶从鱼鳞中提取胶原蛋白,通过单因素实验考察不同前处理、提取介质以及不同的提取方式对胶原蛋白提取效率的影响,研究结果表明:鱼鳞胶原蛋白的最佳提取工艺为采用微波辅助去杂,以0.1mol/LHCl浸泡除钙,再以1%的柠檬酸(含1%胃蛋白酶)作为提取介质,并用超声辅助提取的方法得到的I型胶原蛋白。把纯化后的鱼鳞胶原蛋白用以红外光谱分析,确定所提取鱼鳞胶原蛋白的特征基团。本文以Ca(NO32·4H2O、(NH42HPO4和NH4HCO3为原料,采用化学沉淀法辅以微波辐射制备了含碳酸根的纳米缺羟基磷灰石(d-CHA)、磷酸三钙(TCP)、不含碳酸根的纳米缺钙羟基磷灰石(d-HA)、以及HA,通过共混法和共沉淀的方法制得不同类型的磷酸钙/胶原复合支架,并将其通过在模拟体液中的浸泡来考察其生物活性。然后采取XRD、IR、SEM等现代化分析手段,以及化学物理分析方法,对复合材料的成分、微观结构、孔隙率等性质进行了分析和表征。研究结果表明:采用化学沉淀法辅以微波辐射所制备的d-CHA是制备复合支架的理想材料。含碳酸根纳米羟基磷灰石/胶原复合材料从自身结构成分分析更接近人体自然骨的成分,而且其孔隙率可达65%以上,能满足骨细胞生长的要求。该复合材料材料能够达到一定的抗压强度,能满足骨缺损填充材料的要求,同时强度也可以通过控制支架形成的孔隙率来调整其强度以满足不同的需要。所以含碳酸根纳米缺钙羟基磷灰石/胶原复合支架可望成为具有良好生物相容性、力学性能及生物降解性,能符合骨细胞生长的复合生物材料。
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