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背景急性淋巴细胞白血病(ALL)患者经系统化疗后的缓解率有了很大的提高,但仍有20%左右的患者预后较差,最终死于复发。微小残留病(MRD)是导致ALL复发的根本原因。流式细胞仪是检测MRD的技术之一,可检测到更低指数级的白血病细胞,但B系淋巴细胞白血病患者治疗后增生期骨髓中伴有正常的B系祖细胞,因此检测较复杂,需寻找多个白血病相关免疫表型(LAIP)进行流式细胞术(FCM)分析,标记以提高检出率,更加准确地评估患者的预后和复发趋势,为临床干预提供参考。目的探讨多色流式细胞仪对检测急性B系淋巴细胞白血病(B-ALL)微小残留的方法及临床应用价值。方法选择我院确诊为B-ALL的患者71例作为研究对象,初诊时采用三色FCM和两组六色抗体组合对患者进行免疫分型,完全缓解(CR)后于化疗第33天、3个月、6个月、9个月、12个月抽取骨髓作为标本,根据诊断时的免疫分型,检测MRD水平。采用Cox回归分析复发的影响因素。结果(1)三色与多色FCM免疫分型结果比较:三色B系相关抗原CD19、CD20、CD22 阳性率分别为 65.77%、40.85%、100.00%,六色分别为 100.00%、40.85%、98.59%;三色FCM分T系相关抗原CD5阳性率4.23%,六色为6.82%;三色髓系相关抗原CD13、CD33阳性率分别为22.54%、35.21%,六色为25.35%、33.80%;三色非系列相关抗原CD10、CD34阳性率分74.65%、83.10%,六色为78.87%、84.51%;差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)FCM定期检测情况:33天时标危组、高危组MRD￥10-4的构成比例是82.35%、62.07%;3 个月时分别为 76.47%、53.85%;6 个月时分别为 70.59%、50.00%;9个月时分别为55.17%、45.00%;12个月时分别为57.14%、42.11%,标危组MRD￥10-4的构成比例均高于高危组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)MRD水平与复发的关系:第33天63例患者进行检查,MRD≥10-4与MRD<10-4患者复发率分别为41.18%和6.52%;3个月时60例患者进行检查,复发率分别为35.00%和0.00%;6个月时58例患者进行检查,复发率分别为41.67%和0.00%;9个月时49例患者进行检查,复发率分别为29.16%和0.00%;12个月时47例患者进行检查,复发率分别为13.04%和0.00%;各时点MRD≥10-4患者复发率均高于MRD<10-4患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析显示,33天MRD≥10-4、3个月MRD≥10-4、危险分层高危及My表达阳性是B-ALL患者诱导缓解后复发的危险因素(P<0.05)。结论(1)多色FCM所用的抗体总数较少,但通过多重设门,与三色流式细胞术免疫分型基本相同。而且多色FCM同一试管中可同时检测多种抗原,并根据初诊免疫分型时检测出的LAIP调整抗体组合,有利于获得B-ALL患者化疗缓解后的MRD水平。(2)在B-ALL患者化疗缓解后33天、3个月时多色FCM检查MRD>10-4提示复发风险增加,可作为判断预后、复发并指导临床个体化治疗的手段。