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本研究以环境激素双酚A(BPA)和邻苯二甲酸二甲酯(DMP)为研究对象,使用上转换纳米材料NaYF4:Yb,Tm和NaYF4:Yb,Er作为荧光信号标记物,磁性聚苯乙烯微球作为分离介质材料,建立了一种检测双酚A的上转换荧光标记-磁分离免疫检测方法和一种同时检测双酚A和邻苯二甲酸二甲酯的双色上转换荧光标记-磁分离免疫检测方法。采用活化酯方法制备双酚A包被原;利用热分解法合成了粒径均一的油溶性上转换荧光纳米材料;采用配体交换法对油溶性上转换荧光纳米材料表面进行羧基修饰合成出水溶性上转换荧光纳米材料;利用活化酯方法将上转换纳米材料与双酚A抗体偶联制备荧光信号探针,将磁性聚苯乙烯微球与包被原偶联制备捕获探针。经过条件优化,当信号探针和捕获探针添加量均为100 μL,孵育时间为50 min时,成功建立了双酚A上转换荧光标记-磁分离免疫检测方法,方法检测限为0.1 μg L-1,线性范围为0.1～500 μg L-1;与其他结构类似物无交叉反应,特异性良好,并且该方法对桶装饮用水,瓶装矿泉水,河水,白酒和白菜样品的添加回收测定结果与高效液相色谱法(HPLC)的测定结果具有很好的一致性。利用热分解法合成了两种荧光光谱互相不重叠的上转换纳米材料,经羧基修饰后再分别与BPA抗体和DMP抗体偶联制备两种信号探针。磁性聚苯乙烯微球与各自包被抗原偶联制备两种捕获探针。将BPA和DMP两种单一检测体系合并成一个检测体系,在980 nm激光激发下,分别在483 nm和553 nm处获得两组荧光发射峰,实现两种目标物的同时检测。经过条件优化,当两种捕获探针添加量均为50 μL,两种信号探针的添加量均为60 μL,孵育时间30 min。在此条件下,成功建立了同时检测双酚A和邻苯二甲酸二甲酯的双色上转换荧光标记-磁分离免疫检测方法,BPA检测限为0.1μg L-1,线性范围0.1～500 μg L-1,DMP检测限为1μg L-1,线性范围为1～1000μg L-1。该方法与BPA以及DMP的结构类似物均无交叉反应。河水和桶装饮用水样品添测定结果与仪器测定结果具有很好的一致性。