骨髓间质细胞移植促进缺血性脑损伤修复的实验研究

来源 :第三军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qingqing20090756
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目的脑损伤后脑内神经元的再生和组织修复及其困难,药物治疗不能取得理想效果,往往遗留永久性神经功能缺失。近年研究还发现,移植骨髓间质细胞至脑损伤区,也可促进脑功能的恢复。提示骨髓间质细胞移植是促进损伤后脑组织修复和改善神经功能缺失症状的具有实际应用价值的手段。正常神经功能依赖于复杂的神经网络联系,研究MSCs对宿主神经纤维的影响,有助于进一步探索骨髓MSC s移植促进脑功能恢复的机制。方法实验动物分为3组:空白对照组:前脑缺血再灌流模型。移植物阴性对照组:冻融坏死骨髓间质细胞移植至双侧海马CA1区。MSCs移植组:骨髓间质细胞移植至双侧海马CA1区。体外分离、培养、扩增MSC s,BrdU标记。制作前脑缺血模型。空白对照组注入等量PBS,阴性对照组移植冻融坏死骨髓间质细胞,MSC s移植组移植MSCs。在相应时点,作水迷宫实验、免疫组化及AchE及Timm’s染色。结果MSC s能在体外大量扩增,CD90免疫细胞化学阳性率约98%,BrdU标记阳性率在95%以上。MSC s在颅内能存活,极少量表达BrdU和NeuN,BrdU和GFAP。水迷宫实验中,在定位航行实验中,MSC s移植组和空白对照组有显著差异(P<0.01),阴性对照组和空白对照组有显著差异(P<0.05)。在移植术后12周,MSC s移植组和空白对照组比较、阴性对照组和空白对照组比较,大鼠海马CA1区分子层AchE阳性纤维密度有显著区别,具有统计学意义(P<0.01)。海马AchE阳性纤维密度与潜伏期成负相关关系(r=—0.94)。三组Timm’s染色结果未见明显区别。结论MSC s在体外可以培养及大量扩增,颅内移植后,能在颅内能存活,极少量表达BrdU和NeuN,BrdU和GFAP。MSC s颅内移植对乙酰胆碱能纤维具有保护作用。对苔藓纤维没有影响。MSC s颅内移植可以促进大鼠空间学习能力的提高。MSCs促进缺血性脑损伤修复的机制可能与对中枢胆碱能系统具有保护作用以及移植后造成的微环境有利于功能恢复有关。
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