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目的:通过氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激损伤的研究,探讨Ox-LDL复合物对血管内皮细胞的损伤机制,旨在寻找动脉粥样硬化新的治疗靶点。方法:1.收集吉林大学第二医院动脉粥样硬化患者(n=300)和与之年龄匹配的健康人(n=300)的脂蛋白生物标志物水平,包括TG、TC、LDL-C、apo B、HDL-C、apo A、FFA、Lp(a)。2.采用MTT实验检测Ox-LDL及其复合物对HUVECs增殖活力的影响;采用蛋白免疫印迹分析法检测TRAF3IP2、PPARγ、Cleaved Caspase-3、Bcl-2、Phospho-IKKγ及Phospho-NF-κB p65等的表达水平。3.采用细胞划痕实验观察不同刺激物对HUVECs迁移能力的影响。4.应用化学荧光探针法在荧光显微镜下观察细胞内活性氧(ROS)水平的变化。5.应用免疫荧光染色法观察Phospho-NF-κB p65核易位情况。采用RT-PCR及ELISA方法检测TNF-α、IL-1β及ET-1的m RNA及蛋白水平。结果:1.与健康人相比,动脉粥样硬化患者TG、TC、LDL-C、apo B、FFA及Lp(a)水平均升高(P<0.01),HDL-C及apo A水平均下降(P<0.001)。2.Ox-LDL、Ox-LDL/β2GPI及Ox-LDL/β2GPI/anti-β2GPI三元复合物作用于HUVECs 12 h后,ROS水平升高,细胞迁移能力下降(P<0.05),诱导形成明显的氧化应激损伤,其中Ox-LDL/β2GPI/anti-β2GPI三元复合物处理组作用最强(P<0.001)。阿托伐他汀能减轻这些损伤(P<0.05)。3.Ox-LDL/β2GPI及Ox-LDL/β2GPI/anti-β2GPI复合物处理后,IL-1β、TNF-α及ET-1蛋白及m RNA水平升高(P<0.05),阿托伐他汀可抑制该炎症反应(P<0.05)。4.Ox-LDL/β2GPI/anti-β2GPI三元复合物处理组能够上调TRAF3IP2及Phospho-NF-κB p65蛋白表达水平达到最高(P<0.001)。阿托伐他汀可抑制三元复合物诱导的炎症信号(P<0.01)。5.锌可减轻Ox-LDL对HUVECs造成的氧化应激损伤,降低ROS水平,提高细胞迁移能力(P<0.01),减弱Ox-LDL引起的炎症反应,降低IL-1β、ET-1蛋白及m RNA水平(P<0.05)。6.锌预处理组可抑制Ox-LDL引起的炎症信号,Phospho-NF-κB p65、Cleaved Caspase-3表达水平下降,PPARγ、Bcl-2表达上调(P<0.01)。细胞荧光共聚焦实验显示,Zn能够减弱Ox-LDL引起的Phospho-NF-κB p65入核现象。结论:1.Ox-LDL/β2GPI/anti-β2GPI三元复合物通过TRAF3IP2/IKKγ/NF-κB信号通路,诱导最大程度的血管内皮细胞损伤。2.阿托伐他汀可抑制Ox-LDL/β2GPI/anti-β2GPI三元复合物诱导的HUVECs细胞活力下降、细胞迁移下降、炎症反应、氧化应激损伤等现象。3.锌可以抑制Ox-LDL诱导的HUVECs氧化应激损伤及炎症反应,并且可能通过PPARγ/NF-κB信号通路抑制。