阿奇霉素对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道炎症和气道黏液高分泌的影响

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目的从气道炎症及气道黏液高分泌的角度探讨阿奇霉素对慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)模型大鼠的防治作用。方法将18只雄性SD大鼠依照随机表分为对照组、慢阻肺模型组、阿奇霉素治疗组,每组6只。采用烟熏和大鼠气管内注入脂多糖(LPS)的方法建立慢阻肺大鼠模型。HE染色观察大鼠支气管肺组织病理变化,并测量各组大鼠气管壁以及气道平滑肌厚度。阿尔辛蓝-过碘酸雪夫染色(AB-PAS染色)观察各组大鼠气道杯状细胞。肺功能仪检测大鼠肺功能用力肺活量(the forced vital capacity,FVC),第0.1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in 0.1 second,FEV0.1),呼气峰流速(peak expiratory flow,PEF)。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液(Bronchial Alveolar Lavage Fluid,BALF)中白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量。免疫组织化学法检测各组大鼠支气管肺组织中核转录因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、黏蛋白5ac(mucin5ac,Muc5ac)和Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)蛋白的表达。Western Blot检测各组大鼠支气管肺组织中MUC5ac和TLR4蛋白的表达。荧光定量RT-PCR检测各组大鼠支气管肺组织中MUC5ac m RNA和TLR4 m RNA的表达。结果与对照组相比较,模型组大鼠支气管肺组织HE染色、AB-PAS染色符合慢阻肺病理改变,大鼠气管壁以及气道平滑肌厚度增加明显(P<0.05),肺功能FVC(模型组2.13±0.25ml,对照组7.53±0.88ml)、FEV0.1(模型组0.51±0.30ml,对照组4.46±0.12ml)、PEF(模型组18.46±0.83 L/min,对照组31.43±1.46 L/min)下降显著(P<0.05),BALF中IL-8(模型组605.0±48.7ng/L,对照组341.2±21.4ng/L)、IL-17(模型组89.9±6.9 ng/L,对照组56.0±2.9 ng/L)、TNF-α(模型组212.6±10.7ng/L,对照组127.5±9.0 ng/L)含量显著增高(P<0.05),支气管肺组织中NF-κB、MUC5ac和TLR4蛋白表达水平显著增高(P<0.05),MUC5ac m RNA和TLR4m RNA表达水平显著增高(P<0.05)。与模型组相比较,阿奇霉素治疗组支气管肺组织HE染色、AB-PAS染色显示肺组织损害程度减轻,大鼠气管壁及平滑肌厚度增加程度减轻(P<0.05),肺功能FVC(5.98±0.47ml)、FEV0.1(1.47±0.24ml)、PEF(23.39±1.74 L/min)下降程度减轻(P<0.05),BALF中IL-8(475.7±31.8ng/L)、IL-17(79.2±5.1ng/L)、TNF-α(189.5±9.6ng/L)含量下降(P<0.05),支气管肺组织中NF-κB、MUC5ac和TLR4蛋白表达水平下降(P<0.05),支气管肺组织中MUC5ac m RNA和TLR4 m RNA表达水平下降(P<0.05)。结论阿奇霉素可改善慢阻肺模型大鼠肺功能,减轻病理损害,降低BALF中IL-8、IL-17、TNF-α水平,抑制支气管肺组织内NF-κB、MUC5ac和TLR4蛋白表达,抑制支气管肺组织中MUC5ac m RNA和TLR4 m RNA表达,通过控制气道炎症及气道黏液高分泌达到防治慢阻肺的目的。
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