【摘 要】
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经过几十年的探索和研究,生物材料已成为具有众多优良特性的新型材料,但合成生物材料仍无法完全替代天然组织的所有功能,因此组织工程成为修复组织和器官损失或缺损的理想方式。
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经过几十年的探索和研究,生物材料已成为具有众多优良特性的新型材料,但合成生物材料仍无法完全替代天然组织的所有功能,因此组织工程成为修复组织和器官损失或缺损的理想方式。本研究选用生物活性玻璃(45S5和58S)和丝素蛋白这两种生物材料,制备成生物活性玻璃/丝素蛋白膜复合材料,通过一系列体外实验研究了这一复合膜材料的生物学特性。 首先,通过接触角实验和傅里叶红外光谱仪检测膜材料发现,纯丝素蛋白膜是一种介于亲水和疏水之间的材料,加入生物活性玻璃之后的复合膜亲水性增加;复合膜材料在完全细胞培养液中浸泡24小时后,有磷灰石晶体成分在表面形成。实验结果表示,生物活性玻璃/丝素蛋白复合膜材料具有适度的亲水性,既能作为载体又能释放出矿物离子作为活性物质起到体外矿化作用。 其次,我们将人牙髓干细胞接种于膜材料表面,用扫描电镜和荧光染色观察人牙髓干细胞在膜材料表面的粘附和生长状态;用CCK-8法分别在体外连续培养第4、7、11、14天检测人牙髓干细胞在膜表面的增殖能力;7、14、21天通过碱性磷酸酶活性试验评估人牙髓干细胞分化潜能,用Real-Time PCR检测人牙髓干细胞向成牙本质细胞方向分化特异性基因表达水平。结果表明人牙髓干细胞在膜材料上均黏附生长良好;在第4天时,生物活性玻璃/丝素蛋白复合膜材料上细胞增殖受到抑制,第7天后细胞开始增殖;从第7天起生物活性玻璃/丝素蛋白复合膜上的人牙髓干细胞检测到碱性磷酸酶活性,并且人牙髓干细胞组细胞的碱性磷酸酶活性和成牙本质细胞方向分化特异性基因表达水平均较纯丝素蛋白膜组和对照组的显著上调,这种显著差异具有统计学意义。 本研究选用的45S5和58S两种生物活性玻璃都具有良好的生物相容性和生物活性(即促进细胞的分化),最后本实验比较了45S5/SF复合膜和58S/SF复合膜对牙髓干细胞的增殖和分化的作用。结果显示58S/SF复合膜具有更显著的生物学活性,这种显著差异具有统计学意义。
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