CD14+HLA-DR-/low髓源性抑制细胞在外周T细胞淋巴瘤中的生物学功能及临床意义

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目的:观察外周T细胞淋巴瘤(peripheral T cell lymphoma,PTCL)患者外周血中CD14+HLA-DR-/low髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)及T细胞亚群,探讨CD14+HLA-DR-/lowMDSC在PTCL中的生物学功能,同时观察CD14+HLA-DR-/lowMDSC及CD4+CD25+调节性T细胞(regulatoryT cell,Treg)在PTCL中的预后意义。  方法:流式细胞术检测33例PTCL患者和23例健康成人外周血中CD14+HLA-DR-/lowMDSC细胞和T细胞亚群;用免疫磁珠分选法分选CD3+T细胞、CD14+HLA-DR-/low MDSC细胞和HLA-DR+细胞,并用生物素标记的微磁珠(CD2/CD3/CD28)刺激扩增CD3+T细胞,进行共培养,流式细胞术分析不同浓度CD14+HLA-DR-/lowMDSC对自体CD3+T细胞增殖活性的影响。根据MDSC和Treg的中位数进行分组,分析各组之间临床特点和预后的关系。  结果:  1.PTCL患者CD14+单核细胞/白细胞的比为5.7%(0.70%-20.6%)、CD3+T淋巴细胞/淋巴细胞的比为61.37%(45.20%-76.40%)、CD19+B淋巴细胞/淋巴细胞的比为7.93%(0.10%-22.70%)、CD16+ CD56+NK细胞/淋巴细胞的比为30.60%(9.36%-49.70%),各组与健康成人对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。淋巴细胞中CD4+CD45RO+T淋巴细胞/CD4+T淋巴细胞的比为60.00%(33.62%-87.23%)、CD4+CD45RA+T淋巴细胞/CD4+T淋巴细胞的比32.12%(6.67%-57.84%)、CD8+CD45RO+T淋巴细胞/CD8+T淋巴细胞比为44.20%(1.52%-67.01%)、CD8+CD45RA+T淋巴细胞/CD8+T淋巴细胞比为61.15%(5.06%-79.03%),上述各组与对照组之间差异亦无统计学意义(P>0.05)。  2.PTCL患者外周血中CD14+HLA-DR-/low细胞/CD14+单核细胞为3.28%(0.40%-17.74%),CD4+ CD25+Treg/CD4+T淋巴细胞为8.81%(0.76%-78.11%)均高于健康成人对照组,差异具有统计学意义(P<0.05); PTCL患者外周血中 CD4+CD25+Treg/CD4.+T淋巴细胞的比值8.81%(0.76%-78.11%)与CD14+HLA-DR-/CD14+单核细胞的比值3.28%(0.40%-17.74%)呈正相关(相关系数r=0.510),差异有统计学意义(P<0.05)。  3.PTCL患者外周血中CD14+HLA-DR-/low细胞与T细胞比例为1∶1时对自体T细胞增殖活性的抑制最强;加入精氨酸酶1(arginase1,ARG1)抑制剂nor-NOHA后T细胞的增殖率可恢复至75.09±5.18%、加入吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)抑制剂1-MT后T细胞的增殖率可恢复至84.05±2.93%,IDO抑制剂和ARG1抑制剂联合组T细胞的增殖率可恢复至97.80±2.20%。  4.根据CD14+HLA-DR-/lowMDSC是否大于3.28%,分为高MDSC组和低MDSC组。低MDSC组3年总生存(over survival,OS)率为58.8%,中位生存时间为30(8~40)月;高MDSC组3年OS率为18.8%,中位生存时间为15(6~40)月。两组之间具有显著性差异(X2=5.134,P<0.05)。PTCL患者根据国际预后指数(International prognostic index,IPI)分为低危组(IPI=0~1)和高危组(IPI=2~4)。高危组患者CD14+HLA-DR-/low/CD14+的比例4.65%(0.72%-17.74%)高于低危组患者2.80%(0.40%~5.66%),差异具有统计学意义(T=192.000,P<0.05)。根据CD4+CD25+/CD4+的比例是否大于8.81%,分为高Treg组和低Treg组。低Treg组3年OS率为60.6%,中位生存时间为32(8~40)月,高Treg组3年OS率为13.3%,中位生存时间为14(6~39)月,差异有统计学意义(X2=8.971,P<0.05)。单因素分析显示IPI评分、CD14+HLA-DR-/low/CD14+、CD4+CD25+/CD4+是影响患者OS的危险因素(P<0.05)。多因素分析显示PTCL外周血CD4+CD25+/CD4+比例是影响患者OS和无进展生存(progression-free survival,PFS)的危险因素(P<0.05)。  结论:  1.PTCL患者外周血中存在CD14+HLA-DR-/loWMD SC细胞群,数量高于健康成人对照组。  2.免疫表型为CD14+HLA-DR-/low的细胞对T淋巴细胞增殖具有抑制作用,其作用机制可能和ARG1及IDO有关,CD14+HLA-DR-/lowMDSC比例与CD4+CD25+Treg比例正相关。  3.CD14+HLA-DR-/loWMDSC与PTCL的IPI评分及OS相关,PTCL外周血中CD14+HLA-DR-/loWMDSC和CD4+CD25+Treg比例增高是PTCL的不良预后因素。
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