牛瑟氏泰勒虫病是由泰勒科、泰勒属的瑟氏泰勒虫(Theileria sergenti)寄生于牛的红细胞以及淋巴细胞内,所引起的一种血液原虫病。近年来随着养牛业的不断发展,牛瑟氏泰勒虫病的发生也呈上升趋势,严重影响相关国家的畜牧业发展。但由于目前尚无临床应用疫苗,而严重影响养牛业的健康发展。因此,本研究从牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白基因和牛白细胞介素-18基因着手,根据GenBank上报道的两基因核苷酸序列,设计两对特异引物,利用SOE-PCR技术扩增p23-IL-18融合基因,将其克隆到pMD18-T载体,构建pMD18-T-p23-IL-18重组克隆质粒,经PCR和酶切鉴定后测序,再将p23-IL-18融合基因亚克隆到pET-28a原核表达质粒构建pET-28a-p23-IL-18,并转化至大肠杆菌进行诱导表达,将表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析；以克隆质粒pMD18-T-p23-IL-18为模板,经PCR扩增得到用于真核表达的融合基因片段p23-IL-18,并将其克隆到pMD18-T上,在将融合基因亚克隆到真核表达质粒pVAX-1构建pVAXI-p23-IL-18,经PCR和酶切鉴定后,将表达转染至BHK21细胞,收集培养细胞进行RT-PCR及IFA检测。结果表明,成功克隆了p23-IL-18融合基因,并在大肠杆菌中获得表达,表达蛋白大小约为48ku,可被牛瑟氏泰勒虫阳性血清识别；成功构建了牛瑟氏泰勒虫pVAXI-p23-IL-18真核表达质粒,RT-PCR与IFA结果表明,融合基因在BHK21细胞中成功转录,并获得表达。本试验结果为牛瑟氏泰勒虫病基因工程亚单位疫苗和DNA疫苗研究奠定了基础。