花刺参钙调蛋白基因克隆与表达分析

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xufuen2001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
钙调蛋白(calmodulin,CaM)是一类小分子的单聚体钙离子结合蛋白,具有调控细胞增殖和凋亡、学习和记忆、信号通路交联、分泌和代谢以及肌肉收缩等生命活动的功能。脊椎动物有2-4个CaM基因,无脊椎动物一般则只有1个CaM基因,仅在海胆(Arbacia punctulata)中发现有两个CaM基因。花刺参与A.punctulata同属棘皮动物门,在进化上拥有独特的地位。研究花刺参CaM基因序列信息、分析花刺参CaM的表达特点有助于了解CaM基因的进化特点,对研究CaM在海参生命活动中所起的作用有重要意义。  首先,作者根据所在实验室之前获得的一段花刺参CaM(命名为StmCaM)的EST序列设计特异性引物,并结合RACE技术克隆得到了StmCaM cDNA全长序列。StmCaM cDNA全长1394bp,其中包括长138 bp的5UTR、806 bp的3UTR和450 bp的ORF。ORF推导出来的StmCaM含149个氨基酸(包括起始蛋氨酸),预测分子量约为16.7kDa,等电点为4.3。花刺参CaM同其他后生动物CaM相比同源性很高,与真海鞘(Halocynthia roretzi)、白氏文昌鱼(Branchiostoma lanceolatum)、中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)的相似度最高(98%);与哺乳动物CaM的相似度最低(95.9%)。  随后,根据已克隆得到的StmCaM cDNA序列设计了5对特异性引物,并从花刺参纵肌束中提取总DNA。经PCR扩增、测序,得到StmCaM基因全长序列。StmCaM基因全长11852bp,和脊椎动物CaM基因一样含6个外显子和5个内含子。StmCaM基因内含子1、2、3、5与脊椎动物CaM基因内含子1、2、3、5的位置完全一致,仅内含子4出现一定偏离。  最后,选取了花刺参体壁、体腔液、呼吸树和肠四种组织,并利用real-timePCR检测StmCaM基因在其中的表达情况。Real-time PCR结果显示,StmCaM基因在呼吸树中表达量最高,其次是体腔液和肠;体壁中表达量最低,几乎检测不到。
其他文献
生命的呼唤——杨尔特诉礼泉县教育局、教育工会追索募捐款一案的前前后后这是一起全国首例因募捐款纠纷而引起的诉讼案,它的结果或许不太重要,重要的是它将促使中国募捐立法的
n-3族高度不饱和脂肪酸(PUFAs),尤其是二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)是具有重要生理功能的生物活性物质.它们在水产养殖中对鱼、虾、贝幼体的生长和发育极为重要,
学位
很多人在看了本刊发布的《2016年度中国直销企业业绩排行榜》后,感觉有些失落。他们发现一直被冠以“朝阳行业”的直销行业增长率甚至没有跑过国家GDP,是不是直销行业的未来
学位
Streptomyces sp.SCSIO03032是一株从印度洋深海沉积物中分离到的链霉菌,通过优化发酵条件,从其发酵产物中分离到双吲哚生物碱类化合物spiroidimicins、聚酮类化合物heronamide
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
作为长期碳汇,海洋沉积物中埋藏的大量有机碳对全球碳循环和气候变化有重要影响。有机碳从海洋输出到沉积物中后,在沉积物中还要经历有氧降解和无氧降解。有机物降解是一个十
琼东南盆地位于南海北部大陆边缘西段,是南海北部陆缘主要含油气盆地之一。盆地构造沉降史分析、地热特征及深部热结构研究,对于探索该盆地形成、演化的地球动力学过程及油气资
江泽民同志在党的十五大报告中强调,要“加快干部制度改革步伐,扩大民主、完善考核、推进交流、加强监督,使优秀人才脱颖而出,尤其要在干部能上能下方面取得明显进展”。明