【摘 要】
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目的:探讨RNA干扰抑制ERK1/2基因表达对胃癌细胞株SGC7901Ezrin表达及细胞侵袭和迁移能力的影响。方法:免疫组化法检测Ezrin蛋白在胃癌组织及癌旁正常胃黏膜组织中的表达情况。
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目的:探讨RNA干扰抑制ERK1/2基因表达对胃癌细胞株SGC7901Ezrin表达及细胞侵袭和迁移能力的影响。方法:免疫组化法检测Ezrin蛋白在胃癌组织及癌旁正常胃黏膜组织中的表达情况。常规培养SGC7901细胞株,针对人ERK1及ERK2基因序列,选取并设计RNA干扰靶点,构建ERK1/2RNA干扰质粒。应用脂质体Lipofectamine2000TM将RNA干扰质粒转染入SGC7901细胞。采用RT-PCR和Western免疫蛋白印迹法检测ERK1、ERK2的表达及Ezrin的表达情况。用Tranwell小室检测转染后SGC7901细胞株的侵袭转移能力变化情况。结果:1、免疫组化结果显示Ezrin蛋白在胃癌组织中呈明显高表达,阳性率为88.75%,而在癌旁正常黏膜组织中表达阳性率为23.75%,两者存在显著差异性。2、对转染48小时后的SGC7901细胞进行RT-PCR和Western Blot检测细胞系ERK1、ERK2、Ezrin基因mRNA和蛋白表达情况的结果显示,经过RNA干扰ERK1/2的表达,细胞内ERK1、ERK2mRNA及蛋白表达水平明显下降,Ezrin在ERK1及ERK2RNA干扰质粒组中mRNA及蛋白表达明显下调。3、Transwell小室检测SGC7901细胞系在转染ERK1/2RNA干扰质粒24h后侵袭迁移能力结果表明,ERK1及ERK2RNA干扰组细胞的侵袭和迁移能力均明显下降。结论:1、Ezrin在胃癌组织中高表达。2、RNA干扰ERK1/2后可下调SGC7901细胞Ezrin mRNA及蛋白的表达。3、RNA干扰ERK1/2均可使SGC7901细胞的侵袭和迁移能力下降。
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