具有抗真菌活性海洋细菌的筛选鉴定

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从烟台莱山海域采集的柄海鞘中,分离得到25株海洋细菌,3株海洋酵母菌,20株海洋霉菌。采用滤纸片法,以曲霉、毛霉、黑根霉、青霉作为指示菌株,对目标菌株进行抑菌实验,筛选得到产生抗真菌活性物质的海洋细菌B2、N3、N4、N5、B7、B2、N2、N4。通过菌落形态和生理生化鉴定,初步确认菌株B2、B2为鳗弧菌生物变种I(Vibrio anguillarum Biovar I),N2为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),菌株N4为墨西哥假黄色单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana),菌株B7为解硫胺素类芽孢杆菌(Paenibacillus thiaminolyticus),菌株N3为芽孢杆菌属(Bacillus),菌株N4为泛菌属(Pantoea sp),菌株N5为环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)。  挑选抗菌活性最强的海洋细菌N2和N4进行16SrRNA分子序列分析,绘制系统发育树,结合菌落形态和生理生化特征,可以确定菌株N2为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),N4为墨西哥假黄色单胞菌(Pseudoxanthomonas mexicana)。  对菌株N2进行培养基优化的研究,结果显示,培养基中淀粉含量0.5%,葡萄糖含量2.7%,蛋白胨含量0.8%,酵母粉含量0.1%,甘油磷酸钠含量0.12%时,菌株的生长速度最快,抑菌效果最好。为提高菌株N2的抑菌效果,对其进行了紫外诱变,得到了3株正突变菌株,抑菌效果较好,但是遗传稳定性差,传代3次后均失去抑菌能力。
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