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实验一Ouabain诱导大鼠弱精子症模型建立的实验研究目的为探讨Ouabain引起弱精子症的病理机制,建立SD大鼠腹腔注射Ouabain诱导的弱精子症动物模型。方法健康性成熟SD雄性大鼠40只,随机分为对照组10只(生理盐水10mg/kg/d),低剂量实验组15只(Ouabain 12.5ug/kg/d),高剂量实验组15只(Ouabain 25ug/kg/d),连续腹腔注射30d,观察各组大鼠附睾精子活力及活动率的变化,同时观察本实验剂量范围的Ouabain对大鼠生殖系统及全身可能的毒性反应。结果与对照组相比,实验组大鼠精子数量无明显变化,精子活力及活动率显著下降。高剂量及低剂量Ouabain组连续给药30d后大鼠附睾精子活力分别为48.27%和44.73%,与对照组(73.33%)相比有显著性差异(p<0.01),且高、低剂量组间差异有显著性(p<0.01);高、低剂量组大鼠精子活动率分别为52.26%和49.95%,与对照组(78.70%)相比有显著性差异(p<0.01),高、低剂量组间差异亦有显著性(p<0.01);本试验剂量范围内,Ouabain对大鼠生殖器官及全身重要脏器未显示明显的毒性反应。结论Ouabain经腹腔注射给药30d能成功诱导SD大鼠弱精子症模型的建立,且未见明显的生殖系统和全身毒性反应。实验二小鼠睾丸间质细胞分泌Ouabain的探索性研究目的检测体外培养的睾丸间质细胞经hCG、FSH干预后分泌Ouabain的功能,通过对小鼠睾丸间质细胞功能的研究来探讨其与Ouabain及弱精子症之间的关系。方法体外培养小鼠睾丸间质细胞,用不同浓度的hCG(0U, 4U,8U,16U,32U,64U,100U,200U)和FSH(0,5,10,20,50,100mU/ml)对小鼠睾丸间质细胞进行干预,收集上清,ELISA竞争法检测待测上清内的Ouabain水平。结果在hCG刺激下的体外培养的小鼠睾丸间质细胞上清液中能够检测到Ouabain,在4U hCG作用下Ouabain水平为49.82pg/ml,在8U hCG作用下Ouabain水平增加为60.70 pg/ml,而在200U hCG作用下Ouabain水平达259.13 pg/ml;在一定浓度范围FSH刺激作用下,体外培养小鼠睾丸间质细胞上清液中未能检测到Ouabain。结论小鼠睾丸间质细胞能够合成Ouabain,且在一定剂量范围内分泌Ouabain的水平随hCG刺激浓度的增高而升高,存在一定的量效关系;但在本实验剂量范围FSH刺激下对小鼠睾丸间质细胞未见影响。