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背景及目的：肿瘤干细胞学说认为肿瘤干细胞是肿瘤发生与复发的根源，针对肿瘤干细胞展开靶向治疗是肿瘤治疗的新方向。由于缺乏公认的宫颈干细胞标记物，使宫颈癌干细胞的研究极为困难，虽然，有学者采用SP法或无血清悬浮培养法，分离出了宫颈癌干细胞样细胞，但它仍不够纯化，更缺乏对明确的表面标记物。本研究拟采用差异基因显示技术，检测经证实富集了宫颈癌干细胞的研究组细胞（SP+细胞及ABCG2+细胞），与缺乏宫颈癌干细胞的对照组细胞进行比较，依据各基因表达丰度差异，筛选出差异序列。为宫颈癌干细胞表面标记物的筛选提供依据，为进一步的宫颈肿瘤干细胞的分离与鉴定打下基础，为宫颈癌以肿瘤干细胞为标靶进行治疗提供线索。方法：1、选取于我院手术治疗的宫颈鳞状细胞癌IB2期患者标本，采用组织块法进行原代培养，冻存、复苏，利用流式细胞技术对建系培养的宫颈癌原代细胞进行SP分选。2、选取宫颈癌Hela细胞进行培养，流式细胞技术进行ABCG2分选。3、分别抽提分选的SP细胞、NSP细胞、ABCG2+细胞、ABCG2-细胞总RNA，逆转录合成cDNA，利用芯片筛选两组细胞的差异表达基因。4、对宫颈癌P10代细胞分选SP细胞和NSP细胞提取RNA进行RT-PCQ检测，检测目的基因的mRNA表达水平，验证差异基因。结果：经过数据分析，在宫颈癌原代细胞中SP细胞的比例为1.66%。与之相对的，Hoechst33342阳性细胞为非侧群细胞（NSP）。在加入ABC转运蛋白抑制剂维拉帕米后，低Hoechst的SP细胞的比例显著降低（＜1%）。免疫荧光标记流式细胞仪检测宫颈癌细胞株Hela细胞中ABCG2+细胞所占比例为11%，其余为ABCG2-细胞亚群。ABCG2+组与ABCG2-组相比，上调基因1801个，下调基因229。SP组与NSP组相比，上调基因1019个，下调基因405。两组对照下调基因中存在55个交集基因，上调基因中存在12个交集基因。EFNB2基因和TM4SF1基因在SP细胞及NSP细胞中均表达。RT-PCR实验结果显示，SP细胞中EFNB2基因表达量是NSP细胞的(7.12)倍。TM4SF1基因表达量是NSP细胞的(7.68)倍。结论：1、宫颈癌原代细胞中分离的SP细胞同ABCG2+细胞一样，具有肿瘤干细胞的特性。2、TM4SF1和EFNB2基因在宫颈癌原代SP细胞中高表达，可作为宫颈癌干细胞候选特异性表面标记物。3、TM4SF1和EFNB2基因为分离宫颈癌干细胞提供了线索,为肿瘤干细胞靶向治疗提供了新的思路和依据。