青稞β-葡聚糖的分离纯化及其理化性质研究

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青稞(Hordeum Vulgate L.var.nudum Hook.f)是一种青藏高原地区的特色农作物,其富含生理活性物质β-葡聚糖,近年来受到广泛的关注。本文以青稞麸皮为原料,采用热水浸提法。通过单因子试验确定了从青稞麸皮中提取β-葡聚糖粗品的工艺参数,研究了各提取因素对青稞β-葡聚糖粗品得率影响的主次顺序,确定了最佳提取参数,并进行了可行性验证。β-葡聚糖粗品经脱蛋白、乙醇醇析、硫酸铵分级、透析、DEAE-52纤维素柱层析和SephadexG-100凝胶柱层析得到β-葡聚糖A和B,确定了用醇析法和柱层析法纯化糖的参数条件,得到了纯化的β-葡聚糖,并对β-葡聚糖A进行了纯度鉴定及理化性质的研究。本研究主要结果如下: (1)青稞中β-葡聚糖在麸皮中含量较高(5.78%),而在青稞面粉中含量较低(2.21%),即青稞β-葡聚糖主要分布在糊粉层细胞壁中。 (2)以青稞麸皮为原料提取β-葡聚糖前进行预处理(高温烘干和乙醇回流)对β-葡聚糖得率影响不大。 (3)试验结果表明,影响青稞中β-葡聚糖得率的各因素主次顺序是pH值、时间和料水比,最佳提取工艺参数为:pH值为9、时间2.0h、料水比1:15、50℃下提取两次,得率为6.65%,纯度64.72%。 (4)调节多糖液的pH值至4.5,去除部分蛋白类物质,进行硫酸铵分级沉淀,最后进行乙醇醇析,得到纯度为88.7%的β-葡聚糖,再经DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-100凝胶柱层析得到一种均一分子质量的β-葡聚糖,得率为0.45%(以青稞麸皮干基计)。 (5)β-葡聚糖A的单糖组成是由葡萄糖组成。样品的分子质量为3.0×105道尔顿;分子结构中存在β-型糖苷键;所得β-葡聚糖不溶于乙醇、乙醚、丙酮等有机溶剂,粘度为42mPa·S,[α]D20(H2O)为:-95.3度;与碘-碘化钾溶液的反应不显色,说明它是非淀粉类多糖,与斐林试剂反应、双缩脲反应、三氯化铁反应、CTAB反应、280nm吸收均为阴性,说明它是不含单糖、蛋白质、多酚类物质、核酸等的中性多糖。
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