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哺乳动物体内对药物的吸收、分布、代谢和排泄与各种代谢酶及转运蛋白密切相关。作为生物体对药物利用的关键环节，药物转运蛋白主要分为外排和吸收两类。前者主要包括以多药耐药性基因(multiple drug resistance gene1，MDR1，又称P-糖蛋白)为代表的ABC转运蛋白家族；而后者则以有机阴离子转运多肽(organic aniontransporting polypeptide，OATP)家族为代表，影响药物在肠道的吸收以及由血液向肾脏与肝脏的传送，从而影响药物对全身或目标组织的作用。有机阴离子转运多肽(Organic anion transporting polypeptides，人 OATPs，动物Oatps)属于溶质转运体(solutecarrier，SLC)超家族，广泛分布于胃肠道、肝脏、肾脏、肺部、血脑屏障等重要器官中，介导物质跨细胞膜的转运。对人类和模式动物的研究发现，OATP是多种药物的吸收转运蛋白，其底物包括强心苷类药物地高辛，抗肿瘤药物甲氨蝶呤，以及他汀类药物等，多种抗生素类药物如β-内酰胺类抗生素、喹诺酮类、大环内酯类抗生素也被认为是通过OATP转运的。作为对多种药物的吸收和转运起重要作用的药物转运蛋白，OATP在提高药物有效吸收过程中发挥着关键的作用。在对人体药物的吸收过程中发现，有效调控OATP可以提高药物的生物利用度，达到提高药效，降低药物用量的目的。虽然有关转运蛋白在人体药物转运中的作用与调控是近年来的研究热点，但关于动物体内相应转运蛋白的研究却仍处于起步阶段。 在人体中，OATP1A2是第一个被克隆的OATP基因。OATP1A2分布在脑部、小肠、肝脏、肾脏等重要的器官中，转运多种内源或外源的化合物，可影响多种药物的生物利用度。而猪的Oatpla2的完整序列迄今仍然欠缺，因此限制了对猪体内这个在药物转运过程中起重要作用的转运蛋白的进一步深入的研究。在本论文中，我们利用NCBI上已有的部分片段序列，运用快速扩增cDNA末端-PCR(rapid-amplification ofcDNA ends-PCR)的方法，从猪肝脏中克隆出完整的Oatpla2序列，对其命名为sOatpla2(NCBI accession number JQ037799)。利用所克隆的sOatp1a2，我们构建了pcDNA3.1-Oatp1a2哺乳动物细胞系统表达载体并将其转染入HEK293细胞进行表达分析与功能测定。所获得的主要结果如下： 1)sOatp1a2的开放阅读框(ORF)包含2001个碱基，编码667个氨基酸。通过测序和比对，sOatp1a2所编码的蛋白sOatp1a2与人OATP1A2有84％的同源性，而与牛Oatp1a2则具有88％的同源性。 2)RT-PCR分析表明sOatp1a2可在HEK293细胞体系表达。对sOatp1a2进行转运功能分析，发现该转运蛋白可转运OATP转运蛋白家族的模式底物牛磺胆酸。sOatp1a2对牛磺胆酸的转运功能是pH依赖的，低pH条件T(pH=6.0)的转运功能高于高pH(pH=7.4)条件下的转运。 3)动力学分析表明，sOatp1a2对牛磺胆酸转运的Km和Vmax值分别为37.95±12.17μM和109.34±20.94pmol/mg protein/2min。 4)对于OATP家族的另一模式底物硫酸雌酮的转运(100nM硫酸雌酮)，sOatp1a2与人体OATP1A2的表现相近，而与牛的Oatp1a2的表现有差别。