目的:用从豚鼠内耳组织中纯化的P0蛋白免疫大鼠,观察实验动物蜗神经髓鞘变化,研究P0蛋白在听神经病的发生发展中的作用。方法:采用SDS-PAGE从内耳组织中分离、纯化P0蛋白,用Western Blot法鉴定纯化的P0蛋白。用纯化的P0蛋白作为抗原免疫大鼠,观察其听性脑干反应阈值,畸变产物耳声发射的变化,血清IgG水平的变化以及蜗神经的髓鞘在光镜电镜下的形态学变化,免疫组织化学技术观察P0蛋白在听神经上的分布。结果:1纯化P0蛋白及其纯度鉴定:纯化后的P0蛋白经SDS--PAGE后显示,只在分子量为30KD的位置上出现单一的蛋白染色带。将经SDS--PAGE电泳后的蛋白转移到硝酸纤维素膜上,用抗P0蛋白的抗体检测示阳性,证明本实验纯化的为P0蛋白。2免疫动物各项检测结果2.1听力学检测结果:根据存活的SD大鼠ABR检测结果,经t检验,实验组动物的ABR阈值较对照组有显著提高(P﹤0.05);以阈值较免疫前升高15 dB为阳性:实验组17只共10耳,对照组19只共1耳,经卡方检验实验组的阳性率较对照组差别具有统计学意义(P﹤0.05)。实验组及对照组的动物的DPOAE均可正常引出。2.2大鼠免疫后血清IgG水平:以测得的吸光度表示IgG水平,免疫后实验组及对照组比较其血清IgG水平差别有统计学意义(P﹤0.05)。2.3蜗神经的形态学变化:光镜下经髓鞘特殊染色后,蜗神经髓鞘未见明显异常。电镜下,实验组大鼠的蜗神经发生明显的脱髓鞘:板层密度不均,可见板层的分离,断裂以及板层间的空泡等;而对照组的大鼠的蜗神经则未见明显变化。2.4 P0蛋白在蜗神经上的分布:P 0蛋白分布在包绕听神经轴突的髓鞘上。结论: P0蛋白作为抗原能诱发蜗神经的脱髓鞘病变,可能是听神经病的重要的发病机制之一。