胰岛素样生长因子Ⅰ与促红细胞生成素经鼻给药后对癫痫大鼠的协同抗凋亡作用

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目的:本实验旨在研究胰岛素样生长因子Ⅰ(Insulin-like growth factorⅠ,IGF-Ⅰ)与促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)经鼻给药后对癫痫大鼠的抗凋亡作用,初步评价小剂量IGF-Ⅰ和EPO经鼻给药的疗效并探讨其可能的作用机制。方法:清洁级雄性SD大鼠,体重200~250g,制作癫痫大鼠模型,按癫痫发作等级筛选出发作在4级~5级的42只大鼠作为研究对象。按2×2析因设计分4组,分别为:生理盐水组、IGF-Ⅰ组、IGF-Ⅰ+EPO组、EPO组,流式细胞仪检测大鼠海马神经元细胞凋亡率;Western-Blot方法检测海马神经元细胞中凋亡蛋白XIAP、Smac/DIABLO及caspase-9的表达。所有结果均采用SPSS13.0软件包进行统计分析。结果: 1.在给药过程中,各组之间大鼠的死亡率差别无统计学意义。(P>0.05)2.流式细胞仪检测神经元细胞凋亡率,EPO组与生理盐水组对比凋亡率显著减少(P<0.01);IGF-Ⅰ组与生理盐水组对比凋亡率也显著减少(P<0.01);IGF-Ⅰ+EPO组分别与EPO组和IGF-Ⅰ组比较能更好的减少凋亡率(P<0.01)。3. Western-blot检测XIAP蛋白表达:EPO组与生理盐水组对比XIAP蛋白表达显著增多(P<0.01);IGF-Ⅰ组与生理盐水组对比XIAP蛋白表达也显著增多(P<0.01);IGF-Ⅰ+EPO组分别与EPO组和IGF-Ⅰ组比较能更大程度的增多XIAP蛋白的表达(P<0.05)。4..Western-blot检测smac/DIABLO蛋白表达:EPO组与生理盐水组对比smac/DIABLO蛋白的表达显著减少(P<0.01);IGF-Ⅰ组与生理盐水组对比smac/DIABLO蛋白的表达也显著减少(P<0.01);IGF-Ⅰ+EPO组分别与EPO组和IGF-Ⅰ组比较能更大程度的减少smac/DIABLO蛋白的表达(P<0.01)。5. Western-blot检测caspase-9活性:EPO组与生理盐水组对比caspase-9蛋白表
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