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目的: 本课题在系统保留盆腔自主神经宫颈癌根治术(Nerve-sparing radical hysterectomy,NSRH)中应用抗坏血酸-美兰还原液(AMB)及硫代硫酸钠-美兰还原液(DMB)两种方法进行神经染色,对比观察两者染色效果,以寻找良好的神经示踪剂,更好地指导手术。 方法: 选取聊城市人民医院妇产科2012年10月-2014年10月因宫颈癌(Ⅰbl~Ⅱa期)行手术治疗的患者62例,随机抽选38例行系统保留盆腔自主神经宫颈癌根治术(Nerve-sparing radical hysterectomy,NSRH),其中18例为AMB染色组,20例为DMB染色;24例行传统的广泛性子宫切除术(radical hysterectomy,RH)为对照组。患者年龄(p=0.431)和体重指数(p=0.424);临床分期:Ⅰb120例,Ⅰb226例,Ⅱa14例;病理检查:鳞癌50例,腺癌4例,腺鳞癌6例;术后第4天常规夹闭尿管并定时开放,术后第12天拔尿管,当日测残余尿,残余尿大于100ml者,予持续导尿,根据残余尿量选择5~7d后拔除,残余尿<100ml时,无需重新留置尿管。所有患者均进行盆腔淋巴结清扫术;病理结果有高危因素者:淋巴结转移、宫旁阳性、阴道切缘阳性、间质浸润深度≥1/2、脉管间质受累、肿瘤局部病灶>4cm、分化差、不良类型等,常规术后辅助放化疗,定期随访,随访内容包括:排尿排便情况,阴道残端愈合及盆腔情况,TCT,腹部CT,胸片,对宫颈鳞癌患者检测鳞状细胞癌抗原(SCC)等。 1、NSRH术中行AMB或DMB染色,示踪盆腔自主神经,肉眼识别,于蓝染组织的边缘处取少量着色被初步认定为神经的组织,做HE染色,取同一组织用S-100抗体做免疫组化,判定神经染色的一致性,对比AMB及DMB两种染色剂的效果。 2、应用免疫组化S-100染色,计算AMB组及DMB组切除子宫骶主韧带残端组织标本神经含量,两组间对比染色效果,并与对照组分别进行对比分析;应用免疫组化TH染色法对比两组标本交感神经染色效果;应用免疫组化VIP染色法对比两组标本副交感神经染色效果。 3、对比分析三组患者术中及术后临床观察指标,术后膀胱功能、直肠功能恢复情况,术后对患者严格随访,对比预后。 结果: 1、AMB及DMB术中浸染,蓝染的组织经HE染色、S-100标记,证实为神经组织。 2、AMB组骶主韧带残端组织中神经的体积密度为0.0237±0.0059,DMB组体积密度为0.0249±0.0058,对照组为0.0676±0.0180,AMB组与DMB组对比,p>0.05,两组与对照组相比,p<0.05,差异有统计学意义。 3、AMB组交感神经体积密度为0.0042±0.0020,DMB组为0.0041±0.0017,对照组为0.0192±0.0036,AMB组与DMB组对比,p>0.05,两组与对照组相比,p<0.05,差异有统计学意义。 4、AMB组副交感神经神经体积密度为0.0060±0.0013,DMB组为0.0059±0.0011,对照组为0.0189±0.0048,AMB组与DMB组对比,p>0.05,两组与对照组相比,p<0.05,差异有统计学意义。 5、AMB组与DMB组手术时间分别为226.43±30.95min、237.50±30.15min,比对照组手术时间(179.76±33.74min)长,p<0.05,差异有统计学意义,AMB组与DMB组术中出血量分别为415.65±130.74ml,405.80±100.12ml,与对照组(466.36±215.22ml)相比,p>0.05,差异无统计学意义。以上观察指标研究组间对比均无统计学差异。 6、AMB组与DMB组术后拔除尿管时间(14.00±5.83天,13.33±5.39天)明显短于对照组(22.48±7.14天),p<0.05。AMB组与DMB组术后肛门排气时间(42.19±10.21h及45.38±12.01h)明显短于对照组(66.02±15.32h),p<0.05。AMB组与DMB组术后排便时间分别为84.12±11.04h与90.26±14.11h,明显短于对照组(100.14±18.64h),p<0.05。以上观察指标研究组间对比均无统计学差异。 7、预后对比:NSRH组与RH组2年生存率均为100%,各组对比无差异,证实,NSRH对生存率没有显著的影响,与RH具有同样的安全性。 结论: NSRH具有可行性和安全性,能有效的避免对盆腔神经组织的损伤,有利于术后膀胱、直肠功能的恢复。在NSRH术中应用AMB及DMB染色效果好,均可作为神经示踪剂,但DMB较AMB更加稳定,故DMB神经染色较为理想。