毛桃玻璃化试管苗恢复及叶柄再生研究

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桃离体再生困难。本试验主要研究了毛桃玻璃化试管苗恢复、叶柄再生、愈伤组织的增殖及再生。主要研究结果如下:1.在毛桃试管苗玻璃化的恢复试验中,将继代培养基中琼脂浓度由6.8 g/L提高至8.0 g/L,即用培养基LP+6-BA0.2 mg/L+IBA 3.0 mg/L+Ad3.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8.0 g/L培养玻璃化试管苗,恢复率最高,可达68.22%。恢复苗与正常苗在叶片含水量、组织结构与细胞形态及后期继代培养中的玻璃化率等方面均无明显差异,说明恢复苗已达到正常水平。2.叶柄再生率最高的培养基为WPM+KT0.5 mg/L+IAA0.5 mg/L+Ad3.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.8 g/L,再生率可达14.49%;其次为MS+KT1.5 mg/L+IAA1.0mg/L+Ad 3.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.8 g/L和SH+KT1.5 mg/L+IAA0.5 mg/L+Ad3.0mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.8 g/L,两者再生率分别为11.59%、10.15%,但三种处理之间并无明显差异;最适的再生培养基p H为5.8;培养基中添加山梨醇10 g/L、蔗糖20 g/L时叶柄再生率为7.14%,其他处理浓度叶柄均无再生;当CPPU浓度为0.5mg/L,NAA浓度由0.05 mg/L上升到0.1 mg/L时,叶柄再生率升高至4.35%;再生叶柄诱导的愈伤质地优于普通叶柄,但并未产生不定芽。3.在愈伤增殖及再生的试验中,培养基中的无机盐浓度越低,愈伤组织褐化越严重,增殖量越少;毛桃茎基部愈伤组织可用LP+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.8 g/L实现快速增殖;添加PEG及以甘油为碳源处理均未使愈伤组织再生出不定芽,但可考虑使用LP+CPPU0.1 mg/L+NAA 0.5 mg/L+CH0.4 g/L附加甘油15或20 ml/L、琼脂6.8 g/L用于光培养愈伤的增殖;LP+TDZ3.0 mg/L+ZT0.5mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.8 g/L用于暗培养愈伤的增殖;毛桃茎薄切片组织可用LP+CPPU 0.1 mg/L+NAA 0.5 mg/L+琼脂6.8 g/L+蔗糖15 g/L+山梨醇15 g/L进行愈伤组织的诱导,所得愈伤质地色泽均较好。
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