面神经损伤后rhEPO对面运动神经元作用的实验研究

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目的:观察重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin, rhEPO)对大鼠受损面神经运动神经元的保护作用及对Caspase-3表达的影响。方法:将75只雌性大鼠随机分为rhEPO治疗组(25)、对照组(25)、假手术组(25),50只大鼠建立左侧面神经干压榨伤动物模型,rhEPO组大鼠致伤后即刻及每天腹腔内注射rhEPO(5000U/kg),连续两周,对照组及假手术组给予等量生理盐水。分别于3d、7d、14d、21d、28d经主动脉穿刺灌注固定,以小脑桥延沟为中心,左右水平切取约2mm厚的脑组织块,包埋后连续切片,采用Toluidine blue染色计算面神经元存活率(L/R),应用原位末端标记(TUNEL)法检测神经元胞体的凋亡,免疫组化检测面神经元Caspase-3的表达。结果:(1)从伤后7d开始治疗组和对照组左侧面神经元存活率逐渐下降,每个时间点治疗组面神经元存活率明显高于对照组(P<0.05);(2)对照组在伤后3d未见Tunel染色阳性细胞,7d见表达,14d数量达高峰,rhEPO组在伤后7d、14d、21d面神经元凋亡细胞数显著减少(P<0.05);(3)伤后3d对照组见Caspase-3表达增加,14d达高峰,28d仍见少许表达,rhEPO组在各时间点Caspase-3表达均明显低于对照组(P<0.05)。(4)伤后18d对照组动物左侧触须仍倒伏,轻微拂动,无闭眼动作,伤后28d左侧触须部分倒伏,有节律性地拂动,动度和速度明显低于正常侧,不能完全闭眼。伤后14天rhEPO治疗组动物左侧触须仍倒伏,轻微拂动,有上睑轻微闭眼动作,伤后28天,触须向前恢复竖起,有节律性地拂动,动度和速度接近正常侧,能完全闭眼。结论:本实验研究表明rhEPO对受损大鼠面神经元有保护作用;降低Caspase-3的表达、抑制细胞凋亡可能是rhEPO治疗创伤性面瘫的重要机制。
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