水稻茉莉酸信号途径的关键基因OsLOX4,OsAOS2和OsLOX3的功能分析

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水稻(Oryza sativa L.)是世界上最主要的粮食作物之一,水稻的产量受到全世界的关注。但是由于病虫害,病原微生物,洪涝灾害,土壤污染等原因导致水稻减产。提高水稻自身抗性是最好的解决办法,而植物的抗性是由一系列基因调控的,所以有必要对植物的抗性基因进行探索研究。植物激素在植物的生长发育过程中起着不可代替的作用。茉莉酸信号途径在植物防御/胁迫应答起着关键性的作用,脂氧合酶(Lipoxygenase,LOX)是茉莉酸合成途径中的第一个关键酶,以前的研究表明丙二烯氧化物合酶(Allene oxide synthase,AOS)与防御胁迫应答相关。在本研究中,我们以茉莉酸途径相关基因(OsLOX4,OsLOX3和OsAOS2)为研究对象。对OsLOX4和OsAOS2上游启动子序列进行分析,OsAOS2基因的启动子区含有TC-rich repeats,预测OsAOS2参与防御胁迫应答,与以前研究结果相一致,OsLOX4基因启动子含有创伤响应元件,参与水杨酸,茉莉酸甲酯激素响应,在此基础上构建了过表达载体OsAOs2-OE和OsLOX-4OE,农杆菌侵染转化,组织培养后,筛选验证,最后得到阳性植株。同时系统发育树揭示了目的基因的进化历史过程,亚细胞定位表明了 OsAOS2可能定位于质膜上。此外,lox3接种稻瘟病菌Guy11后,相比于野生型,更抗病,同时检测相关基因的表达量,我们发现,lox3中AOS2,PBZ1,PR1等与抗病相关的基因表达含量明显高于野生型,所以我们推测OsLOX3基因的沉默可能会提高水稻的抗病性。本研究成果对OsLOX4,OsLOX3和OsAOS2基因功能的解析提供了实验基础与依据。
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