【摘 要】
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飞蝗是世界范围的重要农业害虫,同时也是昆虫生理学,神经生物学以及表型可塑性研究的重要模式生物。在这篇论文中,我们研究了通过注射或是饲喂dsRNA的方法诱导的RNA干扰的特征,希
【出 处】
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中国科学院研究生院 中国科学院大学
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飞蝗是世界范围的重要农业害虫,同时也是昆虫生理学,神经生物学以及表型可塑性研究的重要模式生物。在这篇论文中,我们研究了通过注射或是饲喂dsRNA的方法诱导的RNA干扰的特征,希望在飞蝗中找到基因沉默有效方法或是潜在的飞蝗防治策略。通过干扰11个在飞蝗生长发育中具有重要功能的基因,我们发现注射dsRNA诱导飞蝗发生敏感的系统性的RNAi。无论是从基因表达水平还是出现的表型来看,RNA干扰的效率呈现剂量依赖性的特征。RNAi的效率受目标基因类型以及基因组织特异性表达模式影响。同时,我们研究了通过饲喂dsRNA的方法对中肠特异性表达以及全身表达基因的干扰效果。我们发现即使长时间的饲喂高剂量的dsRNA也不能在飞蝗中启动干扰反应,并证明其主要原因是由于dsRNA在飞蝗中肠中被快速降解。这些结果为更好的将RNA干扰用作遗传研究工具以及害虫防治提供了详细信息。我们进一步研究了飞蝗系统性干扰的机制。我们从飞蝗的基因组中克隆鉴定了唯一一个SID-1同源基因(LmSID-1),该基因在线虫以及哺乳动物的系统性干扰中起重要作用。时空表达分析显示LmSID-1在飞蝗生殖腺中高表达并随着发育呈现持续增加表达的模式。为了验证LmSID-1在飞蝗系统性。RNA干扰中的作用,我们进行了体内和体外实验。体内实验的结果显示沉默LmSID-1基因对于其它基因RNAi效率没有影响。体外实验的结果确认了在果蝇细胞过表达LmSID-1不能加强dsRNA进入细胞。总的来说,我们的结果显示了在飞蝗中可以通过注射dsRNA的方法诱导RNA干扰但是不能通过饲喂的方法启动干扰。另一方面我们的结果说明在昆虫中可能存在不同于线虫和哺乳动物中依赖于SID-1的系统性RNA干扰机制。
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