静脉注射骨髓基质细胞治疗大鼠局限性脑梗死及ICAM-1的表达

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目的 研究细胞间粘附分子-1(Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1),在静脉注射骨髓基质细胞(marrow stromal cell,MSC)治疗局限性脑梗死大鼠脑中的表达。并探讨骨髓基质细胞治疗大鼠局限性脑梗死的作用机制是否与降低ICAM-1的表达有关。 方法 取体重280~300g Wistar大鼠45只(由中国医科大学动物部提供),随机将大鼠分为正常对照组、生理盐水组、骨髓基质细胞组,每组动物15只,每组又随机分为缺血再灌注3天、7天、14天三个亚组,每组动物5只。按Fridenshtein方法采集,分离,培养骨髓基质细胞,免疫细胞化学方法鉴定骨髓基质细胞,取第八代之前的细胞。在接种前一天以终浓度0.1mmol/L的溴脱氧尿苷(bromodeoxyuridine BrdU)标记。接种时,制成单细胞悬液,细胞密度3×10~6/ml。采用改良Longa栓线法制作大鼠局灶性大脑中动脉缺血(middle cerebral artery occlusion,MACO)1小时模型,在大鼠栓塞24小时,骨髓基质细胞组(n=15)每只大鼠股静脉注射1ml 3×10~6的骨髓基质细胞;生理盐水组(n=15)每只大鼠股静脉注射1ml的生理盐水;正常对照组(n=15)每只大鼠栓塞24小时。采用Chen等报道的神经功能损害评分表(Neurological Severity Scores,NSS),分别于移植前,移植后3天,7天,14天进行神经功能缺陷评分。Brdu免疫组化染色,观察Brdu阳性细胞的分布。ICAM-1免疫组化染色,观察ICAM-1蛋白的表达及分布。
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