褪黑素对KA诱导Tau过度磷酸化及过表达的影响

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目的:探讨褪黑素(MT)对海人酸(KA)在小鼠成神经瘤细胞N2a诱导的tau蛋白过度磷酸化及过表达的影响及其机制。  方法:将N2a细胞传代分为四组,即空白对照组(CON组)、MT组(100umol/L MT处理细胞10h)、KA组(50umol/L KA处理细胞8h)、MT+KA组(100umol/L MT预处理细胞2h后,再加入50umol/L KA继续处理细胞8h)。采用细胞免疫荧光技术检测各组N2a细胞中tau蛋白和磷酸化tau蛋白的荧光强度;采用蛋白印迹术检测各组磷酸化tau蛋白和总tau蛋白的含量;同时检测N2a细胞中CDK5和GSK-3β活性。  结果:(1)KA组N2a细胞tau蛋白的表达量显著增高且tau蛋白在Ser404位点发生过度磷酸化,CDK5、GSK-3β的活性显著增加;(2)MT可有效降低KA诱导的tau蛋白过度磷酸化和tau蛋白的含量,且MT+KA组中N2a细胞CDK5、GSK-3β的活性显著降低。  结论:MT可降低KA诱导的N2a细胞Tau蛋白的磷酸化水平及tau蛋白的表达,其作用机制可能是通过调节tau蛋白的表达及降低CDK5、GSK-3β的活性。
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